نام پژوهشگر: محمد کاظم پاپن

نفتویل-گلایسیل-گلایسیل-گلایسین: یک سوبسترای جدید برای سنجش فعالیت آنزیمace به وسیله hplc
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه 1392
  محمد کاظم پاپن   مسعود امانلو

میلیون ها نفر از مردم دنیا از فشار خون بالا رنج می برند. از آنجایی که آنزیم مبدل آنژیوتانسین (ace) در افزایش فشار خون نقش دارد، هدف مهمی در درمان فشار خون و نارسایی قلبی به حساب می آید. این آنزیم، آنژیوتانسین i را که یک دکا پپتید است، به آنژیوتانسین ii تبدیل کرده و این اکتا پپتید با تنگ کردن رگ ها و عروق، باعث افزایش فشار خون می شود. تحقیقات زیادی راجع به اندازه گیری میزان مهار فعالیت آنزیم توسط مهار کننده های مختلف انجام شده است که در اکثر آن ها از هیپوریل-هیستیدیل-لوسین (hhl) به عنوان سوبسترا استفاده شده است. در این پروژه از سوبسترای سنتزی جدید نفتویل-گلایسیل-گلایسیل-گلایسن برای اندازه گیری مهار فعالیت آنزیم استفاده شده است. تحت تاثیر آنزیم، سوبسترا هیدرولیز شده و تولید گلایسیل-گلایسین و نفتویل-گلایسن می کند. در این روش، برای جداسازی محصول و سوبسترا از روش hplc فاز معکوس استفاده شد. شرایط بهینه برای جداسازی با فاز شامل 20% استو نیتریل و 80% آب و ph فاز متحرک به وسیله استیک اسید و آمونیاک در محدوده 5، سرعت عبور 2 میلی لیتر در دقیقه تنظیم شد.پیک ها در 280 نانومتر با زمان بازداری 10 دقیقه مشاهده شدند.. زمان بهینه برای انکوباسیون با استفاده از سوبسترای جدید به دست آمد. از کاپتوپریل به عنوان مهارکننده استفاده شده و ic50 مهار کننده نیز با این روش محاسبه شد