نام پژوهشگر: آناهیت شالوزاد

فرم نوترکیب دومن مرکزی پروتئین آنزیمی pars ii از گیاه جعفری در باکتری
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده کشاورزی 1391
  آناهیت شالوزاد   جعفر ذوالعلی

تکنیک هضم آنزیمی dna هترودوپلکس، یکی از متداولترین تکنیک های مورد استفاده در شناسایی جهش های نقطه ای قطعات ژنومی است. در سال های اخیر تحقیقات متعددی در زمینه شناسایی و معرفی آنزیم های اندونوکلئاز جدید با قابلیت هضم اختصاصی با نواحی هترودوپلکس در ملکول های dna انجام شده است، در حال حاضر آنزیم های cel i و cel ii (آنزیم اصلی کیت های تشخیص جهش ترانس ژنومیک) از گیاه کرفس (apium graveolens l.) در این زمینه کاربرد بسیار گسترده ای دارند. در این تحقیق با توجه به فعالیت نوکلئازی قوی تر عصاره گیاه جعفری (petroselinum cripsum l.) در مقایسه با گیاه کرفس، و همچنین همولوژی بالا بین pars ii و cel ii، دومن مرکزی pars ii (cpars ii) در سیستم بیان باکتریایی (m15) ساخته شد. پروتئین نوترکیب cpars ii از طریق تکنیک sds-page آنالیز گردید نتایج حاصل از الکتروفورز روش sds-page یک باند در موقعیت 30 کیلودالتون نشان داد که منطبق با اندازه مورد نظر بود. از آنجائیکه باکتری e. coli قادر به انجام تغییرات پس ار ترجمه یوکاریوتی مانند گلیکوزیلاسیون نمی باشد و این امر برای فولدینگ تولید پروتئین فعال محدودیت ایجاد می کند. بنابراین پروتئین cpars ii می تواند در این سیستم فعال باشد. و فعالیت آنزیمی پروتئینی نوترکیبی cpars ii بر روی سوبسترای dna هترودوپلکس مورد بررسی قرار خواهد گرفت.