نام پژوهشگر: سمیه مکتوبیان بهارانچی

بیان موقت زنجیره ی سبک آنتی بادی ضد ویروس هاری در گیاه تنباکو
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  سمیه مکتوبیان بهارانچی   حمیده افقی

سالانه حدود 10 میلیون نفر در سرتاسر جهان به ویروس هاری مبتلا می شوند. راه درمان بیماری پس از آلودگی به ویروس واکسیناسیون و سرم درمانی است . آنتی بادی های ضد ویروس هاری در 2نوع hrig و erig هستند که به ترتیب از دو منبع انسانی و اسبی گرفته شده اند. اما کمبود آنتی بادی انسانی و احتمال وجود آلودگی های ویروسی نظیر ایدز در این آنتی بادی ها، همچنین وجود پروتئین های ناخواسته موجود در آنتی بادی به دست آمده از سرم اسب، که باعث ایجاد واکنش ایمنی شدید و ناخواسته با بدن فرد دریافت کننده آنتی بادی می شود، به کارگیری این آنتی بادی ها را به منظور درمان بیماری هاری با مشکلات جدی مواجه کرده است. با توجه به کشنده بودن ویروس هاری و همچنین کمبود شدید آنتی بادی ضد ویروس هاری و هزینه بالای تامین آنتی بادی ضد ویروس هاری وارداتی، امکان تولید آنتی بادی مونوکلونال ضد ویروس هاری در داخل کشور در سیستم-های ارزان قیمت، ایمن وکارا مانند گیاه بسیار مورد توجه می باشد. در این تحقیق، بیان موقت ژن کد کننده زنجیره سبک آنتی بادی مونوکلونال ضد ویروس هاری داخل گیاه تنباکو، مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور پس از اپیتمایز کردن و سنتز ژن کدکننده زنجیره سبک آنتی بادی ضد ویروس هاری این ژن در پلاسمید بیانی مخصوص سلول گیاهی pcambia 1304 قرار داده شد. سپس سازه ی نوترکیب به روش ذوب وانجماد به آگرو باکتریوم تومفسینس انتقال داده شد. انتقال ژن زنجیره ی سبک به برگ های جوان گیاه تنباکو ازطریق تکنیک آگرواینفیلتراسیون انجام شد و تولید پروتئین نوترکیب در گیاه پس از استخراج کل پروتئین،3 روز بعد از اگرواینفیلتراسیون، با آزمون دات بلات و gfp مورد تائید قرار گرفت. در این مطالعه ما اثبات کردیم که زنجیره سبک آنتی بادی مونوکلونال ضد ویروس هاری که قابلیت خنثی کردن آنتی ژن های این ویروس را داراست، به روش بیان موقت درگیاه تنباکوازطریق تکنیک اگرواینفیلتراسیون قابل تولید است.