نام پژوهشگر: غلامرضا حاتم

تعیین هویت گونه های عامل لیشمانیوز پوستی بروش مولکولی nested-pcr و rflp در شهرستان جهرم
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه 1390
  مهدی صادقی   غلامرضا حاتم

تعیین گونه های عامل لیشمانیوز پوستی به روش مولکولی pcr-nested و rflpدرشهرستان جهرم. لیشمانیوز یکی از بیماریهای انگلی می باشد که توسط تک باخته ای از جنس لیشمانیا ایجاد می شود. این بیماری به صورت گسترده در مناطق مختلفی از جهان مشاهده می شود . بیماری دارای طیف وسیعی بوده که در یک طرف آن زخمی ساده است و در طرف دیگر طیف اشکال پوستی ، پوستی مخاطی ، و لیشمانیوز احشایی می باشد که حتی می تواند منجر به مرگ گردد . عوامل لیشمانیوز دارای میزبان مخزن از مهره داران و همین طور میزبان ناقل مرسوم به پشه خاکی می باشد . لیشمانیوز پوستی و احشایی به صورت اندمیک در قسمتهای ایران دیده می شود . در این تحقیق تعیین گونه لیشمانیا مولد لیشمانیوز پوستی به کمک تکنیک های nested-pcr وتایید با روش rflpصورت گرفت که در این مطالعه از 164 بیمار مبتلا به لیشمانیوز پوستی در شهرستان جهرم نمونه گیری شد .در نمونه گیری برای مشاهدات میکروسکوپی از زخم گسترشی بر روی لام تهیه شدو با رنگ آمیزی گیمسا وجود انگل لیشمانیا بررسی شد که 13 لام از نظر مشاهده انگل منفی و151 مورد مثبت گزارش شد. از روش nested-pcr به عنوان روش اصلی جهت تعیین گونه انگل جدا شده از بیماران استفاده شد که در این روش از پرایمر های csb2xf,csb1xr در راند اول و از پرایمرهای3z,lir در راند دم استفاده شد.نتایج حاصل از nested-pcr نشان داد که انگل های جدا شده از بیماران در 12 مورد لیشمانیا تروپیکا و152 مورد لیشمانیا میجر هستندکه در مقایسه با روش مشاهده میکروسوپی این روش دقیق و قابل اعتماد میباشد.از روش rflp برای تایید nested-pcr از آنزیم haeiii استفاده شدکه نتایج حاصل rflp الگوی صحیحی از لیشمانیای در گیر کننده منطقه وتاییدی بر nested-pcr برای شناسایی گونه های لیشمانیا ارایه داد.مطالعات در این منطقه با روش های دقیق فوق الذکر نشان داد که گونه غالب وشایع منطقه لیشمانیا میجر است ولی گونه لیشمانیا تروپیکا نیز مناطق شهری شهرستان جهرم را درگیر کرده است و هر گونه اقدامات کنترلی در این منطقه باید براساس قطع کردن چرخه زندگی انگل صورت پذیرد .