کلسترول یکی از ترکیبات شیمیایی پر اهمیت در بدن انسان می باشد و میزان بالای آن در خون با بروز بسیاری از بیماری ها از جمله بیماری های قلبی و عروقی در ارتباط است. زیست حسگر کلسترول ابزاری مفید برای اندازه گیری این مولکول به صورت گزینش پذیر و دقیق است. در این مطالعه زیست حسگر کلسترول به روش الکتروشیمیایی در بستر پلیمر رسانای پلی پیرول با موفقیت ساخته شد و میزان کلسترول در محلول های ساختگی از آن توسط روش الکتروشیمیایی کرونوآمپرومتری اندازه گیری گردید و مشخصات عملکرد الکترود آنزیمی مورد بررسی قرار گرفت. الکترود آنزیمی ساخته شده حدتشخیص، حساسیت، گستره ی پاسخ دهی خطی و km به ترتیب برابر mm9/0، amm-1µ 148/5، mm 6-1 و mm 05/2 از خود نشان داده است. از آنجایی که عوامل متعددی از جمله پتانسیل اندازه گیری و ph محلول کلسترول، غلظت آنزیم و روش تثبیت آنزیم در نحوه ی پاسخ دهی الکترود آنزیمی ساخته شده تأثیر گذار هستند، بنابراین لازم است تا بهینه سازی پاسخ الکترود در آزمایش های اندازه گیری کلسترول مورد بررسی قرار گیرند.به همین منظور در مرحله ای دیگر به بررسی تأثیر پتانسیل اندازه گیری کلسترول به وسیله ی الکترود آنزیمی پرداخته شد و الکترود آنزیمی بهترین پاسخ را در پتانسیل 7/0 ولت نشان می دهد . اثر ph محلول کلسترول روی پاسخ الکترود آنزیمی بررسی گردید. برطبق نتایج تجربی ph برابر7، ph بهینه برای اندازه گیری کلسترول می باشد.