نام پژوهشگر: مهزاد حسینی

مقایسه دو روش mpn-pcr و mpn-culture در تعیین تعداد باکتری لیستریا مونوسیتوژنز در شیر
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده دامپزشکی 1391
  مهزاد حسینی   عبدالله جمشیدی

هدف از انجام این مطالعه مقایسه دو روش mpn-pcr و mpn-culture در شمارش باکتری لیستریا مونوسیتوژنز تلقیح شده به شیر استریل می باشد. برای انجام این کار تعدادcell/ml 103 از باکتری لیستریا مونوسیتوژنز و نیز باکتری های زمینه ای مختلف به شیر استریل تلقیح شدند. پس از آماده سازی رقت های متوالی، از هر رقت در سه لوله حاوی محیط غنی کننده لیستریا تلقیح شد. پس از 48 ساعت گرمخانه گذاری، برای آزمایش mpn-culture از سه رقت تلقیح شده برای کشت مجدد از محیط آکسفورد آگار استفاده شد و تایید کلونی های مشکوک توسط آزمایش های بیوشیمیایی انجام گردید. برای انجام آزمایش mpn-pcr، از سه رقت استفاده شده در روش mpn-cultureبرای استخراج dnaو انجام تست pcr با استفاده از پرایمرهای اختصاصی لیستریا مونوسیتوژنزاستفاده گردید.آزمایشات سه بار تکرار شدند و میانگین تعداد شمارش شده توسط هر روش، به طور جداگانه محاسبه گردید. تعداد شمارش شده توسط روش mpn-pcr دقیق تر از روش mpn-culture بود.نتایج نشان داد که روش mpn-pcr در مقایسه با روش mpn-culture حتی در حضور میکروارگانیسم های زمینه ای مختلف روشی سریع تر و قابل اعتمادتر می باشد و شمارش لیستریا مونوسیتوژنز را تسهیل می کند و می تواند جایگزین تکنیک mpn-culture شود.