نام پژوهشگر: اشرف عالمی
اشرف عالمی احمد آسوده
این کار گزارشی از جداسازی، خالصسازی و تعیین ویژگیهای بیوشیمیایی آنزیم آلفا- آمیلاز اسیدوفیل جداشده از باکتری جدید bacillus sp.dr90 موجود در فلور میکروبی چشمه آبگرم دیگرستم است. ابتدا جداسازی، کشت باکتری و شناسایی نسبی جنس آن بر اساس روشهای بیوشیمیایی و مولکولی انجام شد. سپس آنزیم تولید شده با استفاده از روشهای رسوبدهی با سولفات آمونیوم، اولترافیلتراسیون و کروماتوگرافی تبادل یونی با رزین q- سفاروز، خالص شد. وزن مولکولی آنزیم بر اساس sds-page حدود 69 کیلودالتون است. phبهینه آنزیم، 4 و آنزیم در phبین 3 تا 6 پایدار است؛ بنابراین میتوان نتیجه گرفت که آنزیم یک آنزیم آمیلاز اسیدوفیل است. دمای بهینه آنزیم، ?c45 است. یونهایzn2+ و hg2+(1، 5 و 10 میلی مولار) اثر مهاری بر فعالیت آنزیم داشتند. یونهای ba2+، mg2+و fe2+ (1، 5 و 10 میلی مولار) فعالیت آنزیم را افزایش دادند. همچنین یونهای na+،k+ و ca2+ (1، 5 و 10 میلی مولار) تأثیری بر فعالیت آنزیم نداشتند.edta ، pmsfو? ـ مرکاپتواتانول (1، 5 و 10 میلی مولار) تاثیری بر فعالیت آنزیم نداشتند. مقاومت آنزیم به سورفاکتانتهای tition x-100وsds (1، 5 و 10 میلی مولار) نسبتاً خوب است. برای سوبسترای نشاسته مقادیر سینتیکی km و vmaxبه ترتیب، 1- mg.ml4 و µm.min1-.mg1-33/333 است. آنالیز محصولات تولیدی آنزیم توسط روش کروماتوگرافی لایه نازک (tlc) نشان داد که محصول نهایی عمل آنزیم، گلوکز و مالتوز است. اثر چهار مایع یونی شامل 1- اتیل 3- متیل ایمیدازولیوم برماید، 1-بوتیل 3- متیل ایمیدازولیوم برماید، 1- هگزیل 3- متیل ایمیدازولیوم برماید و 1-بوتیل 3- متیل ایمیدازولیوم کلراید، بر روی فعالیت آنزیم آمیلاز نشان داد که این مایعات سبب کاهش فعالیت آنزیم شدند. با توجه به این ویژگیها، احتمال کاربرد آنزیم در صنایع نشاسته و شویندهها وجود دارد.