نام پژوهشگر: مرضیه دانایی

بررسی تأثیر ترکیبات گازی دو باکتری streptomyces coelicolor و streptomyces griseus subsp.griseus در کنترل بیماری های گیاهی و کلونینگ ژن جرماکرادینول/جئوسمین سنتئاز
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی کرمان - پژوهشکده علوم محیطی 1390
  مرضیه دانایی   امین باقی زاده

در طول سالیان گذشته آگاهی دانشمندان در رابطه با انتشار گازها در باکتری ها افزایش یافته و تعدادی از این باکتری ها با این قابلیت به ثبت رسیده است.تأثیر این ترکیبات بر روی گونه های مختلف قارچی طی ده سال گذشته مورد ارزیابی دقیق قرار گرفته است.در این پژوهش تأثیر ترکیبات فرار باکتری های streptomyces coelicolor و streptomyces griseus درکنترل رشد میسیلیوم و جوانه زنی اسپورهای قارچ botrytis cinerea و penicillium chrysogenum بررسی و ژن جرماکرادینول/جئوسمین باکتری s.coelicolor در باکتری e.coli کلون شد. نتایج نشان داد تأثیر ترکیبات فرار باکتری های s.coelicolor و s.griseus درکنترل رشد میسیلیوم قارچ b.cinerea در سطح 001/0 معنی دار بوده است.بطوریکه میانگین رشد میسیلیوم قارچ فوق در محیط باکتری s.coelicolor و s.griseus به ترتیب 16.99 و 14.17میلی متر بوده است در حالیکه در نمونه های شاهد به ترتیب 40.71 و 40 میلی متر بوده است.تأثیر این ترکیبات در کنترل رشد میسیلیوم قارچ p.chrysogenum در سطح 01/0 معنی دار و میانگین رشد میسیلیوم این قارچ در محیط باکتری های s.coelicolor و s.griseus به ترتیب 10.28 و 9.6 میلی متر بوده است در حالیکه درنمونه های شاهد اندازه کلونی ها 16.18 و 16.25 میلی متر اندازه گیری شد.جوانه زنی اسپورهای قارچ های موردنظر که توسط محیط باکتریایی تیمار شده بودند نشان داد که ترکیبات فرار باکتریایی کاملا" از جوانه زنی اسپور آن ها نسبت به نمونه شاهد جلوگیری کرده است.ترکیبات فرار باکتری های مورد آزمایش با استفاده از شیشه های کتابی درب پیچ دار جمع آوری و توسط دستگاه gc/ms شناسایی شدند. در باکتری s.coelicolor هشت ترکیب گازی شناسایی شد که ازبین آن ها بوتانول بیشترین و دی اکسیدکربن کمترین مقدار را دارا می باشند و در باکتری s.griseus بیست ترکیب گازی که به ترتیب فنول،2-متیل-5-1-متیل اتیل وایزو سیکلوسیترال بیشترین و کمترین مقدار را دارا بودند. در قسمت دوم پژوهش ژن جرماکرادینول/جئوسمین سنتئاز(cyc2) به منظور مبارزه با بیماری های گیاهی، با استفاده از کیت کلونینگ inst/aclone شرکت فرمنتاز همسانه سازی شد. ژن مورد نظر به کمک pcr با آغازگرهای اختصاصی جداسازی و پس از عملیات خالص سازی و اتصال ، در ناقل ptz57r/t همسانه سازی شد. به منظور اطمینان از همسانه سازی ژن مذکور، سازه تهیه شده با استفاده از تکنیک های مختلف مانند colony pcr، ، استخراج پلاسمید، توالی یابی و همردیف سازی آن در بانک اطلاعاتی (genbank)، مورد تایید قرار گرفت.