نام پژوهشگر: سارا عبدالملکی
سارا عبدالملکی رضا فتوت
در این پژوهش به منظور افزایش تحمل گندم به تنش های غیر زیستی ناقل پلازمیدی p6u-ubi-fvt1 به اندازه ی 12951 جفت باز دارای ژن مقاومت به هیگرومایسین تحت پیشبر یوبیکوئیتون و ترمیناتور35s در ناحیه t-dna خود به عنوان ژن نشانگر گیاهی ،ژن فلاودوکسین تحت پروموتر یوبیکوئیتون و ترمیناتور نوپالین سنتتاز که به صورت معکوس با ژن نشانگر در وکتور مذکور قرار داده شده است و همچنین ژن مقاومت به استرپتومایسین و اسپکتینومایسین به عنوان نشانگر باکتریایی مورد استفاده قرار گرفت. بیان ژن فلاودوکسین از اغتشاشات ایجاد شده در چرخه انتقال الکترون فتوسنتزی که به دنبال بروز تنش های غیر زیستی رخ می دهد جلوگیری کرده و باعث افزایش تحمل به این تنش ها می شود .صحت وجود ژن در ناقل پلازمیدی با برش آنزیم های kpni و sali و حضور دو قطعه 2265 جفت بازی و 10686 جفت بازی به روش هضم آنزیمی تائید شد. به منظور انتقال این وکتور به ارقام گندم از دو روش تفنگ ژنی و از ریز نمونه کالوس جنین زا و جهت انتقال ژن به روش اگروباکتریم از سویه های lba4404، agl0، eha101 و c58 و ریز نمونه جنین نارس استفاده شد. جهت تائید صحت انتقال ژن از آزمون pcr برای ژن نشانگر و ژن اصلی و دات بلات برای ژن اصلی استفاده شد.