از آنجایی که نیاز به روش های نوین جهت خالص سازی بیومولکول ها در صنایع بیوتکنولوژی رو به افزایش است، روش های بکار گرفته بایستی سریع و انتخاب پذیر بوده و قابلیت کارکرد در مقیاس صنعتی را نیز داشته باشند. سیستم های دو فازی آبی روش ارزشمندی جهت جداسازی و خالص سازی بیومولکول ها به شمار می روند، تفکیک بیومولکول ها توسط این روش بسیار انتخاب پذیر بوده و تغلیظ و خالص سازی نسبی را در یک مرحله انجام می دهد. برای افزایش مقیاس سیستم های دو فازی آبی بایستی عوامل اقتصادی و زیست محیطی را نیز در نظر گرفت. بدین منظور در این تحقیق، پلیمرهای بکار رفته در این سیستم ها را با پلیمرهای هوشمند با قابلیت بازیابی و بازگردانی مجدد به سیستم و نمک های رایج سولفات و فسفات را با نمک سیترات با قابلیت زیست تجزیه پذیری جایگزین کرده ایم. سیستم دو فازی آبی پلیمر-نمک بررسی شده، متشکل از کوپلیمر هوشمند اتیلن اکساید- پروپیلن اکساید در دو جرم مولکولی 2500 و 12000 و نمک تری سدیم سیترات می باشد. داده های تعادلی مایع - مایع شامل منحنی باینودال و خطوط رابط در این سیستم ها در ph های 5، 7 و 10 در دمای ثابت 25?c و هم چنین در 8.3= ph در دماهای 25، 30 و 40 درجه سلسیوس در هر دو جرم مولکولی رسم شده است. هم چنین منحنی استاندارد هدایت سنج نمک و ضریب شکست پلیمر در هر دو جرم مولکولی، به منظور تعیین غلظت پلیمر و نمک در سیستم های دو فازی آبی ارائه گردیده است. خطوط رابط در این سیستم ها و تاثیر ph، دما و جرم مولکولی پلیمر بر آن ها و هم چنین تاثیر حضور انسولین بر منحنی باینودال و خطوط رابط مورد بررسی قرار گرفته است. ضریب تفکیک انسولین در سیستم های دو فازی آبی، با بکارگیری روش پاسخ سطوح (rsm) و بررسی تاثیر هم زمان پارامترهای ph، غلظت پلیمر، غلظت نمک، میزان بیومولکول اضافه شده به سیستم، دما و جرم مولکولی پلیمر انجام گرفته و یک رابطه همبستگی برای ضریب تفکیک انسولین ارائه گردیده است. با آنالیز واریانس مدل مقدارr2 وr2adj به ترتیب برابر 0.98 و 0.96 می باشد، که نشان از دقت بالای مدل ارائه شده برای پیشگویی ضریب تفکیک انسولین در سیستم های دو فازی آبی اتیلن اکساید-پروپیلن اکساید و تری سدیم سیترات دارد. در انتها بازیابی کوپلیمرهای حساس به دما، خالص سازی انسولین و هم چنین عوامل موثر بر میزان بازیابی کوپلیمر مورد بررسی قرار گرفته است.