نام پژوهشگر: محمد رضا سپهری

مقایسه ارتباط اجدادی جدایه های اشریشیا کلی واجد و فاقد ژن حدت iss از موارد کلی سپتی سمی جوجه ها با استفاده از روشrapd-pcr
پایان نامه دانشگاه آزاد اسلامی - دانشگاه آزاد اسلامی واحد گرمسار - دانشکده دامپزشکی 1390
  محمد رضا سپهری   مهدی عسکری بدویی

کلی سپتی سمی یکی از بیماری های مهم طیور صنعتی می باشد که توسط اشرشیا کلی بیماری زا برای طیور (apec) ایجاد می گردد و هر ساله خسارات اقتصادی فراوانی به این صنعت وارد می آورد. قدرت بیماری زایی این باکتری بسته به ژن های حدت آن متفاوت می باشد ، یکی از این ژن ها ، ژن iss است که منجر به افزایش مقاوت سرمی این باکتری در برابر سیستم کمپلمان میزبان می گردد. هدف از انجام این مطالعه بررسی فراوانی اشرشیا کلی واجد و فاقد ژن iss در جدایه های مربوط به کلی سپتی سمی و جدایه های مدفوعی و همچنین بررسی ارتباط اجدادی این جدایه ها به روشrapd-pcrمیباشد. جهت انجام این مطالعه ، حضور و عدم حضور ژن iss ، بر روی 41 جدایه اشرشیا کلی به دست آمده از کلی سپتی سمی و 56 جدایه اشرشیا کلی مدفوعی توسط آزمون pcr و پرایمر های اختصاصی این ژن مورد ارزیابی قرار گرفت و مشخص شد که از 47 جدایه اشرشیا کلی مربوط به کلی سپتی سمی 37 جدایه (90.3%) واجد این ژن و 4 جدایه (9.7%) فاقد این ژن بودند و از 56 جدایه مدفوعی 36 جدایه (64.3%) واجد این ژن و20 جدایه(35.7%) فاقد آن بودند. در نهایت 43 جدایه واجد ژن iss و23 جدایه فاقد این ژن به طور تصادفی انتخاب شدند و تو سط آزمون rapd-pcr مورد بررسی های فیلوژنتیک قرارگرفتند. . بررسی الگوی باند های حاصل از rapd-pcr ، بیانگر وجود 33 پروفایل کلی در 66 جدایه مذکور بود که 19 پروفایل مربوط به 43 جدایه iss+ و 17 پروفایل مربوط به 23 جدایه iss- بود. همچنین در پروفایلهای مربوط به گروه واجد ژن iss باند bp 700 در 25 جدایه از43 جدایه دیده شد که از بیشترین فراوانی (%58) و پس از آن باند bp1000 که در 23 جدایه رویت شد از بیشترین فراوانی (53%) برخوردار بود. در پروفایلهای مربوط به گروه فاقد ژن iss باند bp 800 که در 12 جدایه از 23 جدایه دیده شد از بیشترین فراوانی (%52)و پس از آن به ترتیب باند bp650 (9 جدایه) و bp350(8 جدایه) از فراوانی بیشتری(39%)و(34%) برخوردار بودند . با توجه به فراوانی بیشتر ژن iss در جدایه های مربوط به کلی سپتی سمی(90.3%) می توان به نقش مهم آن در افزایش حدت اشرشیا کلی پی برد. بررسی فیلوژنتیک بیانگر تنوع بیشتر پروفایل ها در گروه فاقد ژن iss می باشد. با توجه به یافته های حاضر با کمک آزمون rapd-pcr تا حد قابل قبولی می توان میان جدایه های واجد و فاقد این ژن تفکیک قائل شد. که احتمالا بیانگر وجود کلونهای غیر مشترک در دو گروه می باشد. با توجه به دانسته های ما گمان میرود مطالعه کنونی اولین مطالعه ای در سطح جهانی است که در آن ارتباط فیلوژنتیک جدایه های واجد و فاقد ژن حدت iss توسط آزمون rapd-pcr مورد بررسی قرار گرفته است. کلمات کلیدی: اشرشیا کلی، کلی سپتی سمی، ژن iss ، rapd-pcr