نام پژوهشگر: زینب مرتضوی میلانی

تثبیت آنزیم آلفا آمیلاز بر روی نانوذرات مغناطیسی اکسید آهن به کمک کربودی ایمید و بررسی فعالیت آن
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده علوم 1390
  زینب مرتضوی میلانی   راضیه جلال

آنزیم آلفا آمیلاز در حضور کربودی ایمید، به صورت مستقیم بر روی نانوذرات مغناطیسی fe3o4 تثبیت شد. نتایج بدست آمده نشان داد که بازده فرآیند تثبیت و میزان فعالیت باقیمانده آنزیم آمیلاز تثبیت شده به دمای تثبیت و نسبت جرمی نانوذره: کربودی ایمید: آلفا آمیلاز بستگی دارد. اثر عوامل مختلف مانند دما و ph بر آنزیم آمیلاز تثبیت شده بررسی شد و با آنزیم آمیلاز محلول مقایسه شد. ph بهینه برای آنزیم آمیلاز محلول برابر 6 بود در حالیکه این مقدار برای آمیلاز تثبیت شده 3 واحد به سمت مقادیر اسیدی جابجا شده و مساوی 3 شد. آمیلاز تثبیت شده پایداری حرارتی بیشتری نسبت به آمیلاز محلول نشان داد. آمیلاز محلول و تثبیت شده حداکثر فعالیت خود را به ترتیب در دماهای ° c 20 و ° c 35 نشان دادند. آمیلاز محلول بعد از 19 روز نگهداری در 5= ph آنزیم حدود 42% فعالیت خود را از دست داد. در حالیکه آمیلاز تثبیت شده در این مدت زمان تقریباً 100% فعالیت خود را حفظ کرده بود. آنزیم آزاد نگهداری شده در 3= ph پس از گذشت 13 روز تقریباً تمامی فعالیت خود را از دست داد. در حالیکه آنزیم تثبیت شده ای که در 3=ph نگهداری شده بود پس از 19 روز 26% فعالیت داشت. آمیلاز تثبیت شده پس از 11 مرتبه استفاده، همچنان 45% فعالیت اولیه را در خود حفظ کرده است. مقادیر ثابت میکائیلیس (km) و حداکثر سرعت واکنش (vmax) به کمک معادله لینویور- برک تعیین شد. نتایج نشان داد که مقادیر km و vmax در اثر فرآیند تثبیت افزایش یافته اند.