نام پژوهشگر: حمید رضا صمدی خواه

سنتز لیپوزوم های کاتیونی حاوی نانوذره مغناطیسی و بررسی توانایی این ترکیبات در انتقال ژن جهش یافته لوسیفراز به سلولهای یوکاریوتی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس 1390
  حمید رضا صمدی خواه   سامان حسینخانی

نانولیپوزوها ذرات کلوییدی می باشند که از دو لایه متشکل از مولکولهای چربی تشکیل شده اند. این ترکیبات محفظه هایی را تشکیل می دهند که ذرات معلق بین آنها به دام می افتند. وزیکولهای لیپوزومی به دلیل اینکه توانایی پتانسیل حمل مولکولهای فعال زیستی را دارند، کاربردهایی را در درمان بیماریهای انسان وحیوان پیدا کرده اند. از این رو توجه محققان به این ترکیبات جلب شده است. لیپوزومها مدلی از غشای بیولوژیک می باشندو اخیرا به عنوان حامل برای انتقال ژن و دارو به ارگان های هدف مورد استفاده قرار می گیرند.از این رو از لیپوزومها در درمان بیماریهای سرطان استفاده می شود. تحقیقات اخیر نشان می دهد که لیپوزومهای کاتیونی توانایی به دام اندازی اسید های نوکلئیک و انتقال آنها به سلولهای هدف را دارند. لیپوزومها کاتیونی به دلیل سمیت پایین، آماده سازی آسان،وابسته نبودن به سایز اسیدنوکلئیک و هزینه کم به عنوان یکی از گسترده ترین سیستمهای غیرویروسی برای انتقال ژن مورد استفاده قرار می گیرند. راههای مختلفی برای افزایش کارایی ترانسفکشن لیپوزوم ها انجام شده است که می توان به استفاده از لیگاندها برای هدفنمد سازی آنها، استفاده از ترانسفرین، استفاده از آنتی بادی هاو سایر موارد اشاره کرد. در این تحقیق برای افزایش کارایی ترانسفکشن و همچنین هدایت این ترکیبات به ارگان هدف، لیپوزومهای کاتیونی حاوی نانوذره مغناطیسی تهیه گردید. این نوع لیپوزومها با قرار دادن نانوذره مغناطیسی داخل لیپوزوم های کاتیونی تهیه شدند. و از یک میدان مغناطیسی خارجی برای هدایت آنها به ارگان هدف و تجمع آن برروی دیواره سلولی استفاده گردید. استفاده از غلظت های بالای مگنت باعث افزایش سایز cls/pdna می-شود. کارایی ترانسفکشن در سلولهای cho با استفاده از ژن گزارشگر لوسیفراز مورد بررسی قرارگرفت. از طرفی استفاده از گزارشگرهای زیستی به دلیل مزیت هایی مانند غیر تهاجمی بودن آنهادر تصویر برداری از داخل بدن موجودزنده مورد استفاده قرار می گیرند. رایج ترین این گزارشگرها ژن لوسیفراز می باشد که نور سبز-زرد تولید می کند. از طرفی لوسیفراز مولد نور قرمز به دلیل اینکه قابلیت عبور از بافت را دارد می تواند به عنوان یک گزارشگر حساس در سیستمهای invivo imaging مورد استفاده قرار بگیرد. در این مطالعه با استفاده از روش fdel لیپوزومهای کاتیونی (cls) و لیپوزوم های کاتیونی حاوی نانوذره ی مغناطیسی (mcls) آماده سازی شدند. جهت تولید لوسیفراز مولد نور قرمز موتانت مورد نظر در وکتور pgl3 که حاوی لوسیفراز طبیعی می باشد تعیین گردید. بارسطحی و اندازه ی (cls, mcls, cls/ pdna, mcls/ pdna) مورد آنالیز قرارگرفت و کارایی ترانسفکشن این ترکیبات بررسی شد.