نام پژوهشگر: jسمانه فراشی

بررسی بیان ژن گاما گلوبین با کاهش پایدار بیان ژن mbd2 توسط سیستم لنتی ویروسی در رده سلولی k562
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه علوم بهزیستی و توانبخشی 1389
  jسمانه فراشی   مهدی بنان

پروتئین mbd2یکی از مهار کنند ه های ژن گاما گلوبین است.مکانیسم این مهار ناشناخته می باشد.با توجه به بیان ژن گاما گلوبین و پروتئین mbd2در رده سلولی k562،ما از این سلول ها به عنوان سیستم مدل استفاده کردیم.ابتدا پنج کلون لنتی ویروسی حاوی shrna-mbd2در سلول های 293tتست شدند،به این ترتیب که لنتی وکتور های plko.1به همراه shrna-mbd2به صورت گذرا به درون سلول های293tترانسفکت شدند و از اسکلت وکتور plko.1 به عنوان کنترل منفی استفاده شد. چهار کلون کاهش بیان ژن mbd2 را نشان دادند که ما برای ادامه کار دو shrnaرا که بیشترین کاهش را داشتند انتخاب نمودیم.سلول های k562با استفاده از سیستم لنتی ویروسی و روش آلوده سازیco-culture ترنسدیوس شدند.نتیجه اولیه میزان بالایی از کاهش بیان ژن mbd2را نشان داد.همچنین با توجه به مطالعات گذشته مبنی بر القای بیان ژن گاما گلوبین همزمان با کاهش بین ژن mbd2، ما انتظار افزایش قابل توجهی را در بیان ژن گاما گلوبین داشتیم. با تولید رده ی سلولی با کاهش بیان پایدار ژن mbd2 (حدود 70%)،بیان ژن گاماگلوبین حدود 11 برابر افزایش داشت.