مقدمه: امروزه انجماد شیشه ای به منظور حفظ جنین های اضافی در art، در حال تبدیل شدن به یک روش رایج است، اما تأثیرات ژنتیکی این روش مورد ابهام است. هنوز مشخص نیست که جنین های ذوب شده ای که به لحاظ مورفولوژی طبیعی هستند، از نظر ژنتیکی هم طبیعی باشند. از آن جایی که متیلاسیونdnaی نواحی تنظیمی ژن می تواند بیان ژن را مهار سازد، دراین مطالعه اثر انجماد شیشه ای با کرایوتاپ بر متیلاسیون dna و سطح بیان دو ژن تکوینی oct4و mest در بلاستوسیست های موش، مورد بررسی قرارگرفته است. روش ها: جنین های دو سلولی با روش فلاشینگ لوله ی رحم ازموش سوپراووله جمع آوری شده و به دو گروه کنترل و آزمون تقسیم شدند. جنین های دوسلولی گروه کنترل مستقیماً تا مرحله ی بلاستوسیست کشت داده شدند، در حالیکه جنینهای دوسلولی گروه آزمون ابتدا تا رسیدن به مرحله ی چهار تا هشت سلولی کشت شده و سپس با روش انجماد شیشه ای با استفاده از کرایوتاپ، منجمد و پس از دو تا شش ماه ذوب شدند و تا رسیدن به مرحله ی بلاستوسیست کشت داده شدند. بلاستوسیست هایی که از نظر مورفولوژی طبیعی بودند، انتخاب و dna و rnaی آن ها استخراج شد. برای بررسی وضعیت متیلاسیون dna و بیان کمّی این ژن ها به ترتیب، روش تعیین توالی بی سولفیت و real-time rt-pcr مورداستفاده قرارگرفت. یافته ها: نتایج حاصل از آنالیز کمّی pcr نشان داد که سطح بیان هر دو ژن oct4 و mest در گروه آزمون نسبت به گروه کنترل کاهش یافته است. همچنین بررسی متیلاسیون dna نشان داد که وضعیت ایمپرینت ژن mest در گروه آزمون نسبت به گروه کنترل از نظم یکسانی برخوردار نیست همچنین در این گروه یک دی نوکلئوتید cpg در ناحیه ی پروموتور oct4 به صورت هایپرمتیله دیده می شود. نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که روش انجماد شیشه ای با کرایوتاپ اثری منفی بر سطح بیان ژن های oct4 و mest در این جنین ها دارد و به نظر می رسد که این روش انجمادی می تواند الگوی متیلاسیونdnaی ناحیه ی پروموتور این دو ژن را تغییر دهد. احتمالاً کاهش سطح بیان ژن oct4 با هایپرمتیله شدن دی نوکلئوتید cpgی ذکر شده در این ژن مرتبط است.