جنس بروسلا، باکتری های درون سلولی اختیاری هستند که باعث ایجاد بیماری بروسلوزیس در انسان و دام می شوند. روش های تشخیصی مبتنی بر کشت با وجود آنکه استاندارد طلایی محسوب می شوند، حساسیت پایینی (تا 70%) دارند. آزمون های سرولوژیکی به دلیل ایجاد واکنش های متقاطع با سایر میکروارگانیسم ها و نبود الگوهای مناسب جهت تفسیر تیتر های آنتی بادی در مناطق اندمیک، قادر به رفع مشلات پیش روی تشخیص این بیماری نیستند. روش های مبتنی بر pcr با دارا بودن حساسیت و اختصاصیت بالا امکان تشخیص درست و سریع را فراهم کرده است. در این میان، real-time pcr روش نوینی است که با حذف بسیاری از فرایند های وقت گیر، امکان بررسی تولید محصول را در حین انجام واکنش میسر ساخته است. استفاده از پروب taqman موجب افزایش اختصاصیت واکنش می شود. با پیشرفت واکنش و تولید محصول، مقدار پروب بیشتری توسط آنزیم dna-پلیمراز تجزیه می شود و در نتیجه تابش فلورسانس افزایش می یابد و در نهایت توسط دستگاه real-time pcr شناسایی می شود. هدف ما در پروژه ی حاضر طراحی quantitative taqmn real-time pcr بود که علاوه بر شناسایی، توانایی سنجش کمی بروسلا در نمونه های بالینی را نیز دارا می باشد. پس از طراحی پرایمر ها بر اساس ژن bcsp 31، ارزیابی آن تو سط pcr معمولی و سپس sybr green real-time pcr صورت گرفت. پس از تأیید پرایمر ها، یک پروب taqman در فاصله ی 16 نوکلئوتیدی پرایمر بالادست طراحی و بهینه شد. از پلاسمید pjet کلون شده با قطعه ی مورد نظر که توسط آنزیم hind iii به صورت خطی درآمده بود، برای تهیه ی منحنی استاندارد استفاده شد. نتایج ما با استفاده از سویه های استاندارد حساسیت 10 فمتوگرم (معادل سه باکتری بروسلا) و با 14 سویه ی غیربروسلایی اختصاصیت 100% را نشان داد. با استفاده از این سیستم طراحی شده، 25 نمونه ی سرم انسانی و 75 نمونه ی سرم دامی که از لحاظ آزمون سرولوژی رایت مثبت بودند مورد آزمون قرار گرفتند که به ترتیب در 72% و 3/61% موارد مثبت شدند.

مقدمه :بیماری التهابی روده(ibd)یک حالت بدخیم از التهاب روده است که به دلیل اختلال در فلور میکروبی روده میزبان حاصل میشود.اخیراٌ درمانهای پروبیوتیکی به منظور بازگرداندن فلور میکروبی معدی-روده ای به حالت نرمال وکاهش التهاب روده در ibd بسیار مورد توجه قرار گرفته اند. اهداف:مطالعات مختلف آثار ضدالتهابی مخمر غیربیماریزا پروبیوتیک ساکارومایسس بولاردیsaccharomyces boulardii))وباکتری پروبیوتیک گرم مثبت لاکتوباسیلوس کازئی(lactobacillusecasei)را در بیماریibd بطور جداگانه نشان داده اند،بنابراین ما دریافتیم که با استفاده از هر دو پروبیوتیک آثار سینرژیسمی بروز خواهد کرد. مواد و روشها: کولیت با استفاده از تری نیتروبنزن سولفونیک اسید(tnbs)در رتهای نرویستار القا شد.حیوانات در گروههای شش تایی تقسیم بندی شدندکه شامل:گروه نرمال(بدون القا کولیت)،گروه کنترل منفی(دریافت کننده tnbs بدون دارودرمانی)، کنترل مثبت(دریافت کننده روزانه 1 میلی گرم بر کیلوگرم دگزامتازون بصورت خوراکی) میباشند.گروه پیشگیری قبل از القای کولیت روزانهcfu 108×1 l. caseiوs. boulardii کشت یافته در آب پنیر دریافت کردندوگروه درمان بعد از القای کولیت روزانه cfu 108×1 l. caseiوs. boulardiiکشت یافته در آب پنیر دریافت نمودند. دوره درمان10 روزه بودوپس از آن حیوانات کشته شده و قسمت انتهایی کولون آنها به منظور بررسی مارکرهای التهابی مانند فاکتور نکروزدهنده تومور- آلفا (tnf-? )،میلوپراکسیداز(mpo )و پراکسیداسیون لیپیدی(lpo) و میزان آسیبهای بافتی جدا شد. نتایج:نتایج نشان داد کهl. caseiوs.boulardiiکشت یافته در آب پنیر میزان آسیبهای بافتی کولون،tnf-? ،mpo وlpo را در گروه درمان بهبود می بخشد. با این وجود ،درمان پروبیوتیکی در گروه پیشگیری اثر مثبتی را نشان نداد.بحث:در خاتمه،اثرات سینرژیسمی ترکیبl. caseiوs.boulardiiنشان دادندکه پروبیوتیکهای مذکور میتوانند در پروتوکلهای درمانی ibd مورد بررسی قرار بگیرند.

مقدمه: بیماری التهابی روده(ibd)یک التهاب شدید در مجرای گوارشی است. پروبیوتیکها خاصیت ضد التهابی در درمان اختلالات معدی روده ای مانندibdدارند. سویه های لاکتوباسیلها و سویه های بیفیدوباکتریاها نخستین میکروارگانیسمهایی هستند که بعنوان پروبیوتیک دسته بندی شدند. اهداف: مطالعات قبلی نشان دادندلاکتوباسیلوس کازئی(lactobacillus casei)وبیفیدوباکتریوم بیفیدوم(bifidobacterium bifidum )بطور جداگانه کاهنده سطوح مارکرهای زیستی التهابی و تنظیم کننده پاسخهای ایمنی در مدلهای موشی کولیت هستند. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیرات ضد التهابی l. casei بعلاوه b. bifidum کشت داده شده در آب پنیر بر بهبود ibd بود. روش کار: ما در مطالعه مانl. caseiوb. bifidum را بطور مجزا در آب پنیر کشت دادیم، سپس این پروبیوتیکها را ترکیب نموده بصورت خوراکی به مدت 10 روز به موشهای رت نر نژاد ویستار تجویز نمودیم. به وسیله تجویز رکتال تری نیتروبنزن سولفونیک اسید(tnbs)کولیت القا شد. حیوانات به 5 گروه دسته بندی شدند که شامل: نرمال(بدون کولیت)، کنترل منفی(بدون درمان)، کنترل مثبت(دریافت کننده دگزامتازون)، پیشگیری(دریافت کننده l. caseiبعلاوهb. bifidum، 10روز پیش از القا کولیت توسط tnbs)، درمان(دریافت کننده l. caseiبعلاوهb. bifidum، 10روز پس از القا کولیت توسط tnbs)بودند. مارکرهای التهابی شامل: فاکتور نکروزدهنده تومور- آلفا(tnf-?)، میلوپراکسیداز(mpo)و پراکسیداسیون لیپیدی(lpo) تعیین شدند. نتایج: در گروه درمان رتبه ماکروسکوپی بطور معنی داری کاهش یافت و سطوح tnf-?، mpo وlpoکم شد اما در گروه پیشگیری اثر مثبتی در بهبود زخمهای کولون مشاهده نشد. نتیجه گیری نهایی: این داده ها نشان داد که ترکیب l. caseiوb. bifidum توانست تخریب کولون و مارکرهای التهابی را در گروه درمان تسکین دهد. مطالعات بیشتر برای تعیین نقش ترکیب پروبیوتیکهای دیگر در بهبود ibd مورد نیاز است. لغات کلیدی: پروبیوتیکها، مارکرهای التهابی، کولیت، آب پنیر، مدل حیوانی

سرایشوپپتیداز نوعی آنزیم پروتئولیتیک است که بیشتر از یک دهه است که برای کاربرد کلینیکی در دسترس می باشد و می تواند به عنوان یک جایگزین مناسب برای عوامل ضد التهابی غیر استروئیدی به کار رود. هدف از این مطالعه جداسازی سویه هایی از سراشیا مارسیسنس با قابلیت تولید فعالیت پروتئولتیک از محیط طبیعی غرب مازندران می باشد. روش کار: در این مطالعه 150 نمونه محیطی از مناطق غنی از پروتئین تحت شرایط استاندارد نمونه گیری شد. پس از رقیق سازی ایزوله هایی با فعالیت پروتئازی بر روی محیط skim milk agarشناسایی و جداسازی گردید. سپس ایزوله ها مورد ارزیابی ساختاری قرار گرفتند و از ایزوله های گرم منفی استخراجdna به روش سیلیکا ژل صورت گرفت و با استفاده از پرایمر اختصاصی ژن 16s rdna گونه سراشیا مارسیسنس شناسایی گردید. به منظور تعیین توالی محصولات pcr به شرکت ماکروژن کره جنوبی فرستاده شد. ایزوله های سراشیا مارسیسنس، مجددا در محیط براث حاوی منبع پروتئین کازئین کشت و پروتئاز ترشح شده، رسوب و تغلیظ گردید. رسوب تغلیظ شده آنزیم برای ارزیابی وزن ملکولی نسبی و فعالیت آنزیمی sds-page سنجش آنزیمی گردید. نتایج: نتایج نشان داد که از میان 150 نمونه، 60 نمونه دارای هاله پروتئولتیک و گرم منفی بودند که با استفاده از تکنیک pcr اختصاصی تنها 2 ایزوله سراشیا مارسیسنس شناسایی گردید. نتیجه sequensing همولوژی 98% را نشان داد که نشان دهنده سویه جدیدی از باکتری بود.این سویه در ncbi با نام serratia marcescens 424 به ثبت رسید. قطر هاله پروتئولتیک ایزوله n 32 mm و 12 30 mm در دمای 37 درجه سانتیگراد بعد از 48 ساعت اندازه گیری شد. وزن ملکولی پروتئین ترشحی ایزوله nبه طور تقریبی kda 52 و نمونه 12،kda 70-60 و فعالیت آنزیمی نمونه ی n، u/ml 80/199 و نمونه 12، u/ml 29/155 تعیین گردید.

مواد مورد سوء مصرف گوناگون از جمله هروئین، تریاک، مت آمفتامین و آمفتامین با آلودگی های میکروبی متنوعی همراه هستند که منشاء آن فرآیند تهیه و توزیع این مواد است. آثار و عواقب این آلودگی های میکروبی گاها با عوارض خود اعتیاد برابری می کنند. در میان انواع آلودگی ها، باسیلوس بعلت اسپورزا بودن و بعضی از گونه های خطرناک آن همچون باسیلوس آنتراسیس واجد اهمیت مضاعف هستند. از آنجایی که بیماری های ناشناخته در مصرف کنندگان مواد مورد سوء مصرف روبه افزایش است، شناسایی و گزارش عوامل میکروبی آلوده کننده مواد مخدر می تواند از بسیاری مرگ و میر ها و عوارض شدید تر جلوگیری کند. از آنجا که آلودگی به باسیلوس آنتراسیس نیز معمولا به همراه باسیلوس سرئوس و متعاقب دستکاری این مواد ایجاد می شود، تعیین آلودگی به باسیلوس ها می تواند به صورت غیر مستقیم نشان دهنده همه باسیلوس ها از جمله باسیلوس آنتراسیس باشد. در این تحقیق آلودگی چند نمونه مواد مورد سوء مصرف به باسیلوس بررسی شده است. بیست و چهار نمونه مواد مخدر شامل هروئین، تریاک، آمفتامین و مت آمفتامین توسط آزمایشگاه مرجع اداره پزشکی قانونی تهران، بطور تصادفی برای این مطالعه انتخاب و بصورت مجهول الهویه (بلانک) در اختیار پروژه قرار گرفتند. همه نمونه ها با استفاده از متد های استاندارد باکتریولوژیک مورد آزمایش قرار گرفتند. در مجموع همه نمونه ها دارای آلودگی باکتریایی بودند. با توجه به ترکیبات مختلف مواد مخدر و نیز فرایند های گوناگون تهیه و توزیع این مواد در شرایط مختلف، نتایج آزمایش این مواد در نقاط مختلف متفاوت خواهد بود. بنابراین انجام اینگونه غربالگری ها بصورت متناوب و گزارش علمی آنها ضمن آگاهی به جامعه پزشکی برای درمان این افراد، برای توجیه و آموزش قربانیان اعتیاد و خانواده های آنها مفید خواهد بود.

در این پروژه اثر ضد باکتریایی عصاره متانولی و فراکسیون های مختلف حاصل از گیاه pteropyrum aucheri بر استافیلوکوکوس اورئوس، باسیلوس سرئوس و سودوموناس آئروژینوزا بررسی گردید. گیاه جمع آوری شده و عصاره متانولی و فراکسیون های هگزانی، کلروفرمی و متانولی گیاه به روش ماسراسیون تهیه شد .ابتدا سوسپانسیون میکروبی با استفاده از کشت 24 ساعته هریک از گونه ها آماده گردید .پلیت های محتوی مولر هیلتون آگار با سوسپانسیون محتوی نیم مک فارلند تلقیح شدند و تاثیر مهاری غلظت های مختلف عصاره ها با روش انتشار در آگار تعیین گردید. قطر هاله عدم رشد در اطراف هر چاهک اندازه گیری گردید. بیشترین اثر مهاری مربوط به عصاره متانولی علیه استافیلوکوکوس اورئوس بود. این عصاره با همین غلظت و قطر هاله با اندازه مشابه بر پسودوموناس آئروینوزا اثر مهاری داشت. نتایج بدست آمده از این تحقیق نشان داد که عصاره ی متانولی و فراکسیون متانولی حاصل از گیاه مذکور بر علیه هر سه باکتری استافیلوکوکوس اورئوس، باسیلوس سرئوس و سودوموناس آئروژینوزا دارای اثر ضد میکروبی هستند.نتایج حاصل نشان داد که این گیاه اثرات ضد میکروبی مناسبی است.

از آنجایی که عفونت های خونی عامل مهمی در مرگ و میر اطفال در سراسردنیا می باشد و مصرف بی رویه آنتی بیوتیک های نامناسب منجر به بروز مقاومت های شدید میکروبی شده است، پیشگیری از این عفونت ها و درمان آن ها بسیار حائز اهمیت می باشد، لذا در این طرح به بررسی عوامل میکروبی پدیدآورنده ی این عفونت ها و راه های مقابله با آن و نیز بررسی مقاومت های آنتی بیوتیکی پرداخته شد. در این مطالعه نمونه های خونی اخذ شده از بیماران بستری در بخش اطفال، کشت داده شده و به بررسی انواع سوش های میکروبی و مقاومت آن ها نسبت به انواع آنتی بیوتیک ها پرداخته شد.با توجه به این که استاف اپیدرمیدیس جزئی از فلور نرمال پوست می باشد، وجود آن در خون اطفال می تواند باعث بروز عفونت های خونی می شود. لذا توصیه به رعایت اصول بهداشتی توسط پرسنل به خصوص حین خون گیری بسیار ضروری به نظر می رسد. هم چنین به نظر می رسد که جهت کاهش مقاومت های آنتی بیوتیکی، دقت در تجویز داروهای ضدمیکروبی و نیز استفاده ی چرخشی از آنتی بیوتیک ها می تواند کمک کننده باشد.

از آنجایی که عفونت های خونی عامل مهمی در مرگ و میر نوزادان در سراسردنیا می باشد و مصرف بی رویه ی آنتی بیوتیک های نامناسب منجر به بروز مقاومت های شدید میکروبی شده است، پیشگیری از این عفونت ها و درمان آن ها بسیار حائز اهمیت می باشد، لذا در این طرح به بررسی عوامل میکروبی پدیدآورنده ی این عفونت ها و راه های مقابله با آن و نیز بررسی مقاومت های آنتی بیوتیکی پرداخته شد. در این مطالعه نمونه های خونی اخذ شده از نوزادان بستری در بخش مراقبت های ویژه، کشت داده شده و به بررسی انواع سوش های میکروبی و مقاومت آن ها نسبت به انواع آنتی بیوتیک ها پرداخته شد.با توجه به بررسی های صورت گرفته ونکومایسین و آمیکاسین به عنوان حساس ترین آنتی بیوتیک ها در درمان تجربی توصیه می شوند و می بایست از تجویز آنتی بیوتیک های مقاوم کاسته شود. به علاوه تناوب در مصرف آنتی بیوتیک ها می تواند به کاهش در مقاومت های ایجاد شده و نیز کاهش روند بروز مقاومت های جدید کمک نماید. هم چنین با توجه به منشأ پوستی سوش های میکروبی می توان با کنترل بهتر شرایط استریلیزاسیون از انتشار آن ها به داخل خون و نیز به داخل نمونه های خونی و مثبت شدن کاذب نتایج کشت خون ممانعت کرد.

افزایش روز افزون مقاومت های استافیلوکوکی نسبت به آنتی بیوتیک ها سبب شده است که محققان برای یافتن ترکیبات جدید موثر تلاش کنند.گیاهان از دیرباز از منابع غنی داروسازی به شمار می روند. تحقیقات قبلی انجام شده بر گیاهان مریم گلی لوله ای و شکاعی و نیز استفاده از آن ها در طب سنتی ایران ما را بر آن داشت تا اثر ضد استافیلوکوکی عصاره این گیاهان را مورد بررسی قرار دهیم.

گیاه pimpinella affinis یا جعفری کوهی متعلق به خانواده ی چتریان است.با توجه به این که عصاره حاصل از دانه این گیاه اثرات ضد میکروبی قابل توجهی علیه بعضی باکتری های بیماری زا داشته است در این پروژه اثر ضد میکروبی عصاره متانولی حاصل از بخش های هوایی گیاه را بر 4 باکتری pseudomonas aeruginosa staphilacoccus aureus، escherichia coli, bacilus cereus با روش دیسک چاهک mic آزمایش شد. سوش های گرم مثبت استافیلوکوکوس اورئوس و باسیلوس سرئوس بزرگ ترین هاله عدم رشد را داشته اند و سوش های گرم منفی اشرشیاکلای و سودوموناس آیروژنوس مقاوم ترین میکروارگانیسم ها بودند و هیچ هاله عدم رشدی دیده نشد. نمونه بخش هوایی گیاه از دو منطقه گیلان و جاده چالوس جمع آوری شده بود.

در پروژه ی حاضر اثرات ضد قارچی عصاره تام و فراکسیون های اتردوپترولی، کلروفرمی، اتیل استاتی وآبی برگ های گیاه prosopis cineraria علیه سوش های آسپرژیلوس نایجر، آسپرژیلوس فلاووس، آسپرژیلوس فومیگاتوس، کاندیدا آلبیکنز، کاندیدا کروزئی، تریکوفایتون روبروم، میکروسپوروم کانیس و میکروسپوروم جیپسئوم بررسی شده است. فراکسیون اتیل استاتی در غلظت های 8000، 4000، 2000 میکروگرم در دیسک با میانگین قطر هاله عدم رشد به ترتیب 5/24، 8/22، 8/21 میلی متر بیشترین اثر ضد قارچی را علیه تریکوفایتون روبروم نشان داده اند که در مقایسه با اثر کتوکونازول 5/30 میلی متر قابل توجه است. از طرف دیگر فراکسیون اتیل استاتی در غلظت 40000 میکروگرم در چاهک بر روی کاندیدا آلبیکنس مورد آزمایش اثر خوبی، 30 میلی متر نشان داده اند. همچنین نتایج مثبتی از اثر آگونیستی کتوکونازول با فراکسیون اتیل استاتی و کلروفرمی بر سوش های تریکوفایتون روبروم و کاندیدا آلبیکنس به دست آمد.