نام پژوهشگر: سعدالله علیزاده
طاهره فاضلی بهگو سعدالله علیزاده
چکیده این تحقیق جهت بررسی پاسخهای ریخت زایی ریزنمونه های لایه نازک سلولی و هیپوکوتیل به غلظتهای مختلف 2ip و iaa انجام شد تا (تولید کالوس، شاخساره و ریشه) در شرایط آزمایشگاهی بررسی شود. بذرهای رقم تجاری گوجه فرنگی سوپرچیف پس از ضد عفونی در محیط کشت بدون هورمون کشت شدند. تقریباً 7 الی 10 روز پس از کشت بذر ریزنمونه لایه نازک سلولی هیپوکویل به طول 3/0 الی 5/0 میلی متر و ریزنمونه هیپوکوتیل به طول 5/0 الی 1 سانتیمتر حاصل شد.ریزنمونه ها در محیط های کشت دارای پنج غلظت 2ip (0، 3/0، 6/0، 2/1، 2/1) و سه غلظت iaa کشت شدند و در شرایط تاریکی نگهداری شدند.. پس از یک ماه کالوسهای حاوی شاخه به محیط کشت باززایی0محیط کشت ms فاقد تنظیم کننده رشد بازکشت شدند. کالوسهای فاقد شاخه به همان تیمارهای قبلی بازکشت شدند. گیاهچه های با طول بیش از 2 سانتیمتر به محیط کشت ریشه زایی ms دارای 1 میلی گرم در لیتر iba و 5/0 میلی گرم در لیتر ga3 بازکشت شد. گیاهچه ها به پرلایت و سپس به گلخانه منتقل شدند. پژوهش به صورت آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملاً تصادفی با 3 تکرار،در هر پتری دیش 15 لایه نازک سلولی و 10 هیپوکوتیل اجرا شد. فاکتور اول شامل 5 سطح ip2 و 3 سطح iaa بود. اختلاف معنی داری بین غلظتهای مختلف 2ip و نوع ریزنمونه از نظر درصد کالوس زایی وجود داشت (05/0p <). کالوس زایی در محیط کشت فاقد 2ip و دارای 2ip مشاهده شد. درصد شاخه زایی به ازاء ریزنمونه به طور معنی داری تحت تاثیر غلظتهای مختلف 2ip و نوع ریزنمونه و همچنین اثرات متقابل iaa ×2ip و 2ip×explant (01/0> p) و نیز explant ×iaa ×2ip قرار گرفت (05/0p <). در کشت لایه نازک سلولی، درصد شاخه زایی به ازاء ریزنمونه در اغلب محیط های کشت استفاده شده مشاهده شد. درصد شاخه زایی به ازاء کالوس به طور معنی داری تحت تاثیر غلظتهای مختلف 2ip (05/0p <) و نوع ریزنمونه و اثرات متقابل 2ip × iaa و 2ip × explant (01/0> p) بر درصد شاخه زایی معنی دار بود. حداکثر درصد شاخه زایی به ازاء کالوس در محیط کشت فاقد 2ip و دارای 3/0 و 6/0 میلی گرم در لیتر iaa و نیز در محیط کشت دارای 6/0 میلی گرم در لیتر 2ip و 3/0 میلی گرم در لیتر iaa حاصل شد. غلظتهای مختلف 2ip و نوع ریزنمونه تاثیر معنی داری روی قطر کالوس داشتند. اثر متقابل 2ip × explant بر روی قطر کالوس معنی دار بود (01/0>p ) در کشت لایه نازک سلولی، قطر کالوس در 9/0 میلی گرم در لیتر 2ip حداکثر بود. در کشت قطعات هیپوکوتیل اختلاف معنی داری از نظر این صفت مشاهده نشد. غلظتهای مختلف iaa و نوع ریزنمونه تاثیر معنی داری روی درصد ریشه زایی داشتند (01/0>p ). اثرات متقابل explant iaa × (05/0> p) و explant× iaa ×2ip (01/0>p ) بر درصد ریشه زایی معنی دار بود. حداکثر درصد ریشه زایی در کشت لایه نازک سلولی، درمحیط کشت دارای 6/0 میلی گرم در لیتر 2ip و فاقد iaa به دست آمد. در کشت قطعات هیپوکوتیل بسته به ترکیب غلظتهای 2ip و iaa درصد ریشه زایی حداکثر و حداقل بود. غلظتهای مختلف 2ip تاثیر معنی داری روی وزن تر کالوس داشت (01/0>p ). حداکثر وزن تر کالوس در محیط های کشت دارای 3/0 و 6/0 میلی گرم در لیتر 2ip به دست آمد. تعداد شاخه در هر کالوس به طور معنی داری تحت تاثیر نوع ریزنمونه قرار گرفت. از طرف دیگر تعداد شاخه در هر کالوس تحت تاثیر اثر متقابل 2ip × explant (05/0>p ) قرارگرفت. حداکثر تعداد شاخه در هر کالوس در کشت لایه نازک سلولی، در محیط کشت بدون هورمون و محیط های کشت دارای 3/0 و 6/0 میلی گرم در لیتر 2ip حاصل شد. در کشت قطعات هیپوکوتیل اختلاف معنی داری از نظر این صفت مشاهده نشد. درصد شاخه زایی فقط تحت تاثیر اثر متقابل explant × iaa × 2ip قرار گرفت (05/0> p). نتایج حاصل نشان داد که سیتوکینین خارجی برای شاخه زایی در ریزنمونه هیپوکوتیل ضروری نیست و در محیط کشت فاقد 2ip نیز شاخه تولید شد. قطر کالوس به طور معنی داری تحت تاثیر غلظتهای مختلف 2ip و iaa قرار گرفت. همچنین اثرات متقابل iaa× 2ip، explant × 2ip و explant × iaa ×2ip تاثیر معنی داری روی قطر کالوس داشتند (01/0> p). رشد کالوس در همه محیط های کشت بطور مناسبی انجام شد. درصد ریشه زایی به طور معنی داری تحت تاثیر اثرات ساده فاکتورهای مورد مطالعه و نیز اثرات متقابل آنها قرار گرفت (01/0> p). حداکثر درصد ریشه زایی در ریزنمونه لایه نازک سلولی، در محیط کشت دارای 6/0 میلی گرم در لیتر 2ip و فاقد iaa رخ داد. در کشت قطعات هیپوکوتیل، حداکثر درصد ریشه زایی در محیط های کشت دارای 3/0 میلی گرم در لیتر 2ip و فاقد iaa و دارای 3/0 میلی گرم در لیترiaa بود. اختلاف معنی درای بین غلظتهای مختلف 2ip و iaa بر روی وزن تر کالوس وجود داشت. اثرات متقابل iaa × 2ip،explant × 2ip و explant × iaa × 2ip بر وزن تر کالوس معنی دار بود (01/0> p). کل وزن تر کالوس تولیدی از هیپوکوتیل بیشتر از کالوسهای حاصل از لایه نازک سلولی بود. درصد شاخه زایی به طور معنی داری تحت تاثیر اثر متقابل explant × iaa قرار گرفت (05/0> p). حداکثر تعداد شاخه تولیدی در کالوس حاصل از کشت لایه نازک سلولی، در 69/1 شاخه و در کشت قطعات هیپوکوتیل، 28/1 بود. تعداد شاخه در هر کالوس به طور معنی داری تحت تاثیر نوع ریز نمونه قرار گرفت (05/0>p ). تعداد شاخه تولیدی از کالوسهای حاصل از لایه نازک سلولی 45/6 شاخه به و تعداد شاخه حاصل از قطعات هیپوکوتیل (22/3) بود. طول شاخه به طور معنی داری تحت تاثیر ترکیب هورمونی و نوع ریزنمونه قرار گرفت. حداکثر طول شاخه در محیط کشت فاقد 2ip و 6/0 میلی گرم در لیتر iaa مشاهده شد. تعداد گیاهچه باززایی شده در محیط کشت دارای 3/0 میلی گرم در لیتر 2ip و 6/0 میلی گرم در لیتر iaa. حداکثر تعداد گیاهچه باززایی شده در ریزنمونه هیپوکوتیل در محیط کشت فاقد 2ip و دارای 3/0 میلی گرم در لیتر iaa مشاهده شد.
رقیه حاجی بابایی سعدالله علیزاده
چکیده: در این تحقیق اثر اکسین، سایتوکینین و اسید جیبرلیک بر مراحل پرآوری شاخه و ریشه زایی خیار گلخانه ای رقم سلطانی بررسی شد. بذور پس از ضدعفونی، در محیط کشت ms بدون هورمون کشت شدند. ریزنمونه های جوانه جانبی در آزمایش اول و جوانه انتهایی در آزمایش دوم و سوم در محیط های کشت پرآوری شاخه دارای دو غلظت naa (0 و 1/0 میلی گرم در لیتر) و دو غلظت bap (0 و 2/0 میلی گرم در لیتر) و سه غلظت ga3 (0، 5/0 و 1 میلی گرم در لیتر) کشت شدند و به مدت یک ماه تحت فتوپریود 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی نگه داری شدند. در آزمایش اول تجزی? واریانس نشان داد که حداکثر تعداد گره، طول شاخه و طول ریشه و حداقل قطر کالوس تحتانی در محیط کشت فاقد هورمون تولید شد. حداکثر تعداد ریشه در محیط کشت دارای naa و حداکثر وزن تر شاخساره در محیط کشت فاقد هورمون و دارای 5/0 میلی گرم در لیتر ga3 بدست آمد. در آزمایش دوم، حداکثر تعداد گره در محیط کشت فاقد ga3 با و بدون bap و همچنین محیط کشت دارای bap و 5/0 میلی گرم در لیتر ga3 حاصل شد. محیط کشت فاقد ga3 و دارای naa، با و بدون bap و محیط کشت دارای bap و naa و 5/0 میلی گرم در لیتر ga3 حداکثر تعداد شاخ? جانبی را تولید کرد. محیط کشت فاقد naa و bap صرف نظر از وجود یا عدم وجود ga3 محیط کشت بهتری برای بهبود طول شاخ? اصلی بود و محیط کشت فاقد ga3 و bap و دارای naa حداکثر طول شاخ? جانبی را بدست آورد. حداکثر تعداد ریشه در محیط کشت دارای naa، حداکثر طول ریشه در محیط کشت فاقد naa و حداکثر وزن تر شاخساره در محیط کشت دارای bap و naa بدست آمد. در محیط کشت دارای 1 میلی گرم در لیتر ga3، بدون bap و naa کالوسی تولید نشد. در آزمایش سوم، تعداد گره و تعداد شاخ? جانبی در هر شاخساره و طول شاخ? جانبی در غلظت های مختلفga3 ، bap و naa با هم برابر بودند. حداکثر طول شاخ? اصلی و وزن تر شاخساره و تعداد ریشه در محیط کشت دارای naa بدست آمد. حداکثر طول ریشه و حداقل قطر کالوس تحتانی در محیط کشت فاقد هورمون بدست آمد. جوانه های جانبی بدست آمده از آزمایش دوم در محیط کشت ms کامل و محیط کشت ms با نصف غلظت عناصر دارای سه غلظت ga3 (0، 5/0 و 1 میلی گرم در لیتر) و دارای دو غلظت naa (0 و 1 میلی گرم در لیتر) ریشه دار شدند. تمام صفات مورد مطالعه در غلظت های مختلف ga3 و اثر متقابل آن با naa با هم برابر بودند. حداکثر طول ریشه و حداقل قطر کالوس تحتانی در محیط کشت بدون هورمون و حداکثر وزن تر شاخساره در محیط کشت دارای naa بدست آمد. در محیط کشت ms با نصف غلظت عناصر، حداکثر تعداد گره، طول شاخه و وزن تر شاخساره در محیط کشت فاقد هورمون بدست آمد. تعداد ریشه در هر دو غلظت ga3 و naa با هم برابر بود و در محیط های کشت فاقد هورمون و دارای 5/0 میلی گرم در لیتر ga3 کالوسی تولید نشد.