مایکوفنولیک اسید با مهار آنزیم اینوزین منوفسفات دهیدروژناز باعث جلوگیری از انجام مرحله ی کلیدی سنتز نوکلئوزیدهای پورینی یعنی اکسیداسیون اینوزین منوفسفات به گوانوزین منوفسفات می شود.علیرغم اهمیت این دارو و کاربردهای رو به افزایش آن، اطلاعات کمی راجع به آنزیم های درگیر در مسیر تولید mpa در قارچ ها ی تولید کننده ی این ماده موجود است بنابراین، لزوم طراحی یک سیستم بیولوژیکی در تولید این ترکیب احساس می شود.ژن کدکننده آنزیم اینوزین منوفسفات دهیدروژناز (impdh) با استفاده از یک جفت آغازگر اختصاصی توسط pcr از ژنوم قارچ پنی سیلیوم بروی کامپکتوم تکثیر شد. قطعه موردنظر در t/a وکتور همسانه سازی و حضور ژن به روشهای colony pcr، برش آنزیمی و تعیین توالی تائید شد. سپس ژن مورد نظر در وکتور بیانی ppiczb کلون و برای انتقال به مخمر پیکیا پاستوریس آماده شد. انتقال ژن به سلول های مخمری به روش الکتروپوریشن انجام گردید و پروتین نوترکیب تحت کنترل پروموتر aox1در محیط القایی حاوی متانول بیان شد. سپس مقاومت سلول های نوترکیب نسبت به mpa بررسی شد. هم چنین میزان فعالیت آنزیم نوترکیب با بررسی میزان nadh آزادشده در محیط محاسبه گردید. نتایج بدست آمده حاکی از تولید سویه ی نوترکیبی است که در مقایسه با سویه ی وحشی ده برابر نسبت به mpa مقاوم تر است.

چکیده در این تحقیق فاکتورهایی موثر بر بیان پروتئین هورمون رشد انسانی در فضای پری پلاسمی 5 سویه باکتری e. coli با پروموتورها و ساختارهای متفاوت ژنتیکی مورد ارزیابی قرار گرفت. انتخاب یک سویه برتر از بین 5 سویه مذکور بر اساس سه فاکتور: سرعت رشد، پایداری پلاسمید و میزان بیان انجام شد. سویه برگزیده در آزمایشات بهینه سازی جهت بیشینه سازی رشد و تولید هورمون رشد انسانی در فلاسک و کشت ناپیوسته در بیوراکتور استفاده شد. برای غربال فاکتورهای موثر در بیان پری پلاسمی هورمون رشد انسانی از طراحی آماری آزمایشات استفاده شد. فاکتور های با اهمیت شامل دمای تخمیر، غلظت iptg به عنوان القا کننده، زمان پس از القا و od کشت در لحظه القا بودند. داده های حاصل از تاثیر فاکتور های مختلف با استفاده از یک طرح آزمایشی کسری از فاکتویل در دو سطح مورد ارزیابی قرار گرفت. کلیه متغیر های آزمایشی از لحاظ آماری معنادار تشخیص داده شدند. زمان پس از القا به عنوان مهمترین فاکتور در تولید پری پلاسمی هورمون رشد انسانی شناخته شد. انتخاب محیط مناسب بر اساس قابلیت بافر کنندگی محیط کشت، سرعت رشد ویزه و کیفیت ظاهری محیط کشت از لحاظ تشکیل رسوب صورت گرفت. در استفاده از گلوکز به عنوان منبع کربن مکانیسم محرومیت القا کننده در سویه شناسایی شد. با جایگزینی گلیسرول به عنوان منبع کربن این محدودیت بر طرف شد. در ارزیابی سویه در کشت ناپیوسته با استفاده بیوراکتور bioflo3000 استراتژی القا تعیین شد و با استفاده از نتایج قبلی بهره دهی حجمی معادل با mgl-1 68 حاصل شد.

هدف کلی تحقیق، بررسی چالش های فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناروی است. در فصل یک این تحقیق پس از بیان اهمیت زیست فناوری و تجاری سازی یافته های حاصل از آن، مباحث مرتبط با این علم بیان گردید. اهداف و سوالات پژوهش، معرفی جامعه و نمونه تحقیق بخش های بعدی این فصل بودند. در فصل دوم پس از مرور مختصری بر تاریخچه زیست فناوری، کاربردها و فواید آن به همراه شاخه های اصلی و حوزه ها و نیز راهبرد ملی زیست فناوری کشور و ضعف ها و فرصت های این علم عنوان شد. در ادامه وضعیت زیست فناوری در دنیا و ایران مورد بررسی قرار گرفت. در پایان هم چالش های شناسایی شده در فرایند تجاری سازی، توسط پژوهش گر مورد بررسی قرار گرفت. در این فصل پس از مطالعه مقالات مرتبط با موضوع، عمده مدل های تجاری سازی در حوزه صنایع پیشرفته معرفی گردید. در ادامه و در فصل سوم فهرستی از چالش هایی که بر تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری تأثیر گذارند، بر مبنای مطالعه ادبیات و مصاحبه با خبرگان، تهیه گردید. برای بررسی چالش ها، ما به دنبال پاسخ به این سئوال بودیم که موانع موثر در فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری کدامند؟ در همین خصوص چهار سوال فرعی زیر مورد بررسی قرار گرفت. 1- آیا موانع مدیریتی در فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری تأثیر دارد؟ 2- آیا موانع اقتصادی در فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری تأثیر دارد؟ 3- آیا موانع زیر ساختی در فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری تأثیر دارد؟ 4- آیا موانع اجتماعی و فرهنگی در فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری تأثیر دارد؟ نمونه ی آماری این پژوهش 85 محقق بودند که کلیه پرسشنامه ها دریافت و مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. تحلیل های جمعیت شناختی و تحلیل های آماری فرضیه های مختلف تحقیق توسط نرم افزار لیزرل انجام شده و نتایج آن ها تفسیر شد. نتایج تحقیق نشان داد موانع چهارگانه معرفی شده در مدل مفهومی تحقیق بر ابعاد فنی، بازگانی و تولید فرایند تجاری سازی نتایج تحقیقات زیست فناوری تأثیر دارد که در این میان موانع زیر ساختی بیشترین تأثیر را بر ابعاد تولید دارند و موانع اجتماعی و فرهنگی کمترین تأثیر را بر ابعاد بازرگانی دارا هستند. برای بررسی این فرضیه از ضریب همبستگی پیرسون و تحلیل معادلات ساختاری استفاده شده است. همچنین با 99 درصد اطمینان می توان اظهار داشت تمامی فرضیات فرعی که 12 فرضیه هستند، معنادار می باشند و نهایتاً بر اساس یافته های تحقیق پیشنهاداتی ارائه شده است.