نام پژوهشگر: حسین طایفی

اثر تنش شوری بر تغییرات بیوشیمیایی- فیزیولوژیکی سیستم آنتی اکسیدانی گیاه گلرنگ
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده علوم انسانی و اجتماعی 1389
  بهرخ دایی حسنی   حسین طایفی

: شوری یکی از مهمترین عوامل محدود کننده رشد گیاهان محسوب می شود. بنابراین، بررسی سازوکارهای مقابله با این شرایط تنش زا که گیاهان را قادر به سازگاری در برابر آن می نماید ، از اهمیت بسزایی برخوردار می باشد. این ساز و کارهای سلولی، به ویژه در گونه های مقاوم به شوری شامل فرایندهای فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی می باشد که به رشد و بقاء گیاهان در چنین شرایطی کمک می نماید. در این پژوهش بررسی اثرات فیزیولوژیکی و بیوشیمیایی شوری در پنج سطح تیماری (0، 5/12، 25، 50 و 100 میلی مولار ) کلرید سدیم در دو رقم مختلف گلرنگ (carthamus tinctorius l.cvmcc-190 و (carthamus tinctorius l.cv. i l111 در قالب طرح کاملا تصادفی بررسی شد. . کشت این رقمها به صورت هیدروپونیک در بستر پرلیت به مدت 40 روز با محلول غذایی هوگلند تغییر یافته صورت گرفت. بررسی نتایج حاصل از سنجشهای فیزیولوژیکی در رقم il-111 نشان داد که با افزایش سطح شوری، کاهش وزن خشک اندام هوایی و ریشه ، افزایش غلظت عناصر سدیم و کلر و نیز کاهش غلظت عنصر پتاسیم در اندام هوایی و ریشه، کاهش میزان کلروفیل، کاهش سطح برگ و طول ریشه نمونه های مربوطه شدیدتر از روندهای مذبور در رقم mcc-190 می شود، که به نظر می رسد در ارتباط با مقاومت بالای رقم mcc-190 در برابر تنش شوری باشد. سنجشهای بیوشیمیایی شامل بررسی سینتیکی ایزوآنزیمهای مختلف آنزیمهای گایاکول پراکسیداز، کاتالاز و سوپر اکسید دیسموتاز از نقطه نظر بررسی اثر phهای مختلف( پروفایل ph)، سنجش پارامترهای سینتیکی مختلف، سنجش پایداری دمایی و سنجش اثر مهار کننده های سیانید و آزاید و نیز بررسی فعالیت این آنزیمها از طریق الکتروفورز در حالت کنترل و چهار سطح تیمار شوری (5/12، 25، 50 و 100) می باشد. بررسی نتایج حاصل از سنجشهای بیوشیمیایی، بیانگر وجود ایزوآنزیمهای اختصاصی گایاکول پراکسیداز و فعالیت بالا و الگوی مختلف بیان آنها در رقم mcc-190 نسبت به رقم il-111 می باشد. پروفایل ph فعالیت گایاکول پراکسیداز در عصاره برگهای گیاهان شاهد و نیز گیاهان تیمار شده دارای سه نقطه ph اپتیمم در ph های 5/4، 5/6 و 8 در رقم mcc-190 و دو نقطه ph اپتیمم در ph های 5/4، 5/6 در رقم il-111 می باشد. مقایسه کارایی کاتالیتیکی گایاکول پراکسیداز بین دو رقم، نشان دهنده بالا بودن میزان این پارامتر در تمام سطوح تیماری در رقم mcc-190در مقایسه با رقم دیگر می باشد. فعالیت گایاکول پراکسیداز بر روی ژل 4 و 2 ایزوفرم پراکسیدازی را به ترتیب برای رقمهای mcc-190و il-111 آشکار ساخت. گایاکول پراکسیدازها بیان خود را در سطوح بالای شوری افزایش دادند. با این حال در رقم il-111 الگوی بیان این آنزیمها رفتار آستانه ای را از خود نشان دادند، به این معنی که تا سطح مشخص از شوری (25 میلی مولار کلرید سدیم) به بیشینه مقدار خود رسیده سپس با افزایش غلظت نمک میزان آنها کاهش یافته و به حد مقدار شاهد تنزل یافتند. منحنی پروفایل ph فعالیت کاتالاز در گیاهان گروه شاهد و گیاهان تیمار شده با غلظتهای مختلف کلرید سدیم در هر دو رقم نشان دهنده حضور دو نقطه ph اپتیمم در ph های 5/6 و 5/8 می باشد. فعالیت کاتالاز بر روی ژل 2 ایزوفرم این آنزیم را برای هر دو رقم مورد مطالعه آشکار ساخت. نتایج بر این نکته دلالت می کند که ایزوآنزیمهای کاتالاز فعال در ph های5/6 و 5/8 در عصاره برگهای هر دو رقم ویژگیهای سینتیکی جداگانه ای را نشان می دهند. در این پژوهش بررسی فعالیت سوپر اکسید دیسموتاز، بر روی دو رقم mcc-190 و il111 گلرنگ، از لحاظ تعداد ایزوآنزیم بدست آمده هم از طریق پروفایل ph و هم از طریق مطالعه الکتروفورزی، تغییری را در تعداد ایزوآنزیمها در سطوح مختلف شوری اعمال شده در مقایسه با تعداد ایزوآنزیمهای فعالیت سوپر اکسید دیسموتاز در گیاهان شاهد مربوط به هر دو رقم نشان نداد. همچنین، پایین بودن میزان mda به عنوان شاخص پراکسیداسیون لیپیدی ناشی از تنش اکسیداتیو و نیز افزایش میزان فنول تام و تیول تام تحت تنش شوری در رقم mcc-190، باعث افزایش مقاومت این رقم در برابر تنش شوری در مقایسه با رقم دیگر می باشد.

تغییرات پاتولوژیک بافتی و بیوشیمیایی سیستم تنفس درcopd القائی بوسیله سیگار در گربه
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز 1390
  امیرحسین رشیدی   حسین طایفی

بیماری مزمن انسدادی ریه یک بیماری پیش رونده است که با انسداد مجاری هوا و تخریب پارانشیم ریه مشخص می شود. عوامل متعددی چون سیگار، گرد و خاک، ژنتیک و عفونت از جمله عوامل خطر آن هستند. سیستم دفاعی از سه راه در برابر ذرات آسیب زا از بدن محافظت می کند. نخست راه سلولهای پوششی است. راه بعدی دفاع سلولهای التهابی و نهایتا راه دفاع اختصاصی است. استرس اکسیداتیو عامل ایجاد کننده تغییرات آسیب شناختی است. پاسخ های التهابی ایمنی ذاتی و اکتسابی ، سلولهای التهابی، میانجی های التهابی، عدم تعادل پروتئاز-آنتی پروتئاز و استرس اکسیداتیو عوامل موثر در آسیب زایی بیماری هستند. برای مطالعه روند بیماری بخصوص در مبتلایانی که استعمال دخانیات را در تاریخچه خود دارند، از حیوانات به عنوان مدلی برای ارزیابی بیماری استفاده می شود.. برای مطالعه بیماری می توان بحث آسیب و تغییرات بافتی و بیوشیمیایی و خون شناسی را در سه قالب مجزا نمود: فاز حاد و التهابی، فاز تغییر پاسخ دهی (remodeling) و فاز مزمن و فرساینده بیماری.. التهاب اولیه ناشی از دود سیگار با افزایش پاسخ التهابی بدن همراه است که با پیشرفت روند بیماری و طولانی شدن قرار گیری در معرض دود، این پاسخ التهابی خود باعث تخریب ریوی و تنگی مجاری خواهد شد. دسته داروهای مختلفی در درمان این بیماری استفاده می شود که می توان به کورتیکواستروئیدها، متیل گزانتین ها، بتا آدرنرژیک ها و آنتی کولینرژیک ها اشاره نمود. برای مطالعه این بیماری در این پژوهش از گربه به عنوان مدل حیوانی برای القا و مطالعه ی فاز حاد بیماری استفاده شد. بدین منظور چندین گربه از نقاط مختلف شهر تبریز جمع آوری و پس از معاینه اولیه و عدم وجود ضایعات، 13 گربه واکسیناسیون شده و پس از دریافت قرص ضد انگل، وارد قفس شدند. پس از 10 روز دوره وفق پذیری، این گربه ها به 3 گروه (3گربه به عنوان شاهد، 5 گربه به عنوان بیمار و 5 گربه به عنوان درمان )تقسیم شدند. برای 4 روز گربه ها در معرض 190 نخ سیگار در چمبر تعبیه شده بودند. روز پنجم ابتدا گربه ها بیهوش شده، نمونه خونی گرفته می شد و سپس حیوان راحت می شد (exsanguinations). پس از آن مایع شستشوی برونشی-آلوئولی(balf) و مقاطع بافتی اخذ می شد. در بررسی خون شناسی، حجم متراکم سلول های خونی به روش میکروهماتوکریت، سطح پروتئین تام پلاسما به روش بیوره و فیبرینوژن پلاسما به روش ترسیب و هموگلوبین خون به روش سیانوهموگلوبین اندازه گیری شد. تعداد سلولهای قرمز خون، سلولهای سفید خون و تعداد تفریقی سلولهای سفید خون با لام نئوبار شمارش شد. در بررسی بیوشیمیایی آزمایشات روی سرم، پلاسما، balf و عصاره بافتی نای و ریه انجام شد. اندازه گیری پروتئین تام به روش لوری، لیپیدپراکسیداسیون به روش mda و قدرت آنتی اکسیدانی به روش احیای آهن(frap) صورت پذیرفت. در بررسی مقاطع بافتی نسبت سلولهای موکوسی به سروزی غدد زیر مخاطی، شاخص reid و وضعیت آسیب شناختی مقاطع ریه و نای مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که در گروه بیمار نسبت به گروه شاهد تغییرات بافتی، بیوشیمیایی و خون شناسی، همگی حکایت از القای فاز حاد و بروز التهاب داشت. از طرفی با بررسی نتایج مربوط به گروه درمان، تاثیرات ضد التهابی داروی تیوتروپیوم مشخص و بارز بود. با بررسی نتایج حاصله می توان نتیجه گرفت که پاسخ های التهابی بدن تا چند روز اول می تواند جلوی سموم ناشی از دود سیگار را بگیرد اما با پیشرفت بیماری، این پاسخ خود باعث آسیب زایی به بافت ها و مزمن شدن بیماری شده، کاهش ظرفیت تنفسی را به دنبال خواهد داشت. داروی تیوتروپیوم با تاثیرات ضد التهابی خود باعث کاهش روند التهاب و به تعویق افتادن تخریب بافتی می شود همچنین جلوی تاثیرات مخرب سلولهای التهابی بالاخص نوتروفیل ها و ماکروفاژها که با آزاد سازی مدیاتورها و آنزیمهایی چون الاستاز، بافت زمینه را هضم می کنند می شود

تثبیت آنزیم رودنیز کبد گاوی بر روی بستر mno2 نانوحفره جهت اندازه گیری سیانید
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده دامپزشکی 1392
  افشین رحمان پور   افضل کریمی

ورود مواد سیانوژنیک در چرخه غذایی یکی از مباحث مهم در امنیت غدایی می باشد این مسئله ضرورت استفاده از مواد مختلف به عنوان بیوسنسور را آشکار می سازد.آنزیم رودنیز یکی از آنزیم های مهم در سم زدایی یون سیانید محسوب می شود.برای تولید بیوسنسور سیانیدابتدا باید آنزیم رودنیز تثبیت گردد.به طور کلی تثبیت آنزیم ها به روش های مختلفی انجام می گیرد که یکی از این روش ها تثبیت به روش جذب سطحی است.در این تحقیق آنزیم رودنیز کبد گاوی بر روی بستر نانو حفره mno2 به روش جذب سطحی تثبیت و خصوصیات آن با آنزیم در حالت آزاد مقایسه شد.نتایج این مطالعه نشان می دهد که ph بهینه جهت فعالیت آنزیم رودنیز هم در حالت آزادو هم در حالت تثبیت شده برابر با8 می باشد، همچنین دمای بهینه فعالیت آنزیم رودنیز در حالت آزادوتثبیت شده دمای 40 درجه سانتیگراد بدست آمد. بررسی پارامتر های سینتیکی آنزیم رودنیز در حالت آزاد نشان داد که km و vmax آنزیم برای سوبسترای سیانید پتاسیم برابربا 25/3 و 11/6 و برای سوبسترای تیوسولفات 79/5 و 75/7 می باشد. بررسی پایداری آنزیم در دمای 85 درجه سانتیگراد نشان داد که پس از 10 دقیقه انکوباسیون میزان فعالیت آن 69 درصد فعالیت کنترل می باشد. بررسی میزان تکرار پذیری قابل استفاده بودن آنزیم تثبیت شده نشان داد که آنزیم تثبیت شده بر روی نانو حفره mno2 پس از 4 بار شستشو دارای کاهش فعالیتی در حدود 90 درصد کنترل می باشد.