نام پژوهشگر: فردین عمیدی
کبری سید عقیلی عباس فرشاد
هدف از این پژوهش ارزیابی اثر غلظت های مختلف آلبومین سرم گاوی (0، 5، 10و15 درصد) با و بدون حضور غلظت های مختلف زرده تخم مرغ (0، 5، 10و 15 درصد) و اثر جایگزینی آنها با یکدیگر بر قابلیت انجماد پذیری اسپرم بز مرخز، در رقیق کننده پایه تریس- اسیدسیتریک - گلوکز (همراه با 5 درصد گلیسرول) پس از فرآیند انجماد و یخ گشایی می باشد. جنبایی، جنبایی پیش رونده و ویژگی های حرکتی اسپرم با کمک سیستم آنالیز رایانه ای اسپرم اندازه گیری شد. همچنین نرخ بازیابی جنبایی اسپرم با فرمول [100× (جنبایی پیش از انجماد/ جنبایی پس از انجماد)] محاسبه شد. ویژگی های زنده مانی و واکنش آکروزومی و ویژگی های توام (اسپرم زنده/بدون آکروزوم، زنده/آکروزوم سالم، مرده/بدون آکروزوم و مرده/آکروزوم سالم) نیز به روش رنگ آمیزی سه مرحله ای اندازه گیری شد. بخشی از نمونه هر تیمار، پس از سرد شدن تا دمای 5 درجه سانتیگراد (پیش از انجماد در بخار نیتروژن) و بخشی دیگر پس از انجماد، در حمام آب گرم با دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 30 ثانیه بازیابی شده، سپس برای متغیرهای مورد نظر ارزیابی شدند. اثر سطوح مختلف آلبومین سرم گاوی بر متغیرهای جنبایی، جنبایی پیشرونده، نرخ بازیابی جنبایی، زنده مانی اسپرم و از نظر ویژگی های توأم زنده مانی و وضعیت آکروزومی بر درصد اسپرم های زنده/ آکروزوم سالم و اسپرم مرده/ بدون آکروزوم معنی دار بوده (05/0p <)، در حالیکه بر واکنش آکروزومی، ویژگی های حرکتی اسپرم و از نظر ویژگی های توأم زنده مانی و وضعیت آکروزومی بر درصد های اسپرم زنده/ بدون آکروزوم و مرده/ آکروزوم سالم معنی دار نبود (05/0p >). سطوح مختلف زرده تخم مرغ بر تمام ویژگی های فوق الذکر به جز فاکتور اسپرم زنده/ آکروزوم سالم تفاوت معنی دار نداشت (05/0p >). نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد، در عدم حضور زرده تخم مرغ و حضور سطوح آلبومین سرم گاوی، کمترین سطح آلبومین (5 درصد) و بطور عکس و مشابه، در عدم حضور آلبومین سرم گاوی و حضور زرده تخم مرغ، کمترین سطح زرده (5 درصد) نسبت به سطوح دیگر، اثرات مطلوب و رقیق کننده های حاوی بیش از 5 درصد زرده تخم مرغ و آلبومین سرم گاوی اثر نامطلوب روی ویژگی های زنده مانی، جنبایی و مقاومت انجمادی اسپرم بز داشته و در ترکیب توام آن دو با یکدیگر، سطح 5 درصد آلبومین سرم گاوی همراه با سطح 10 درصد زرده تخم مرغ نسبت به سطوح دیگر، ویژگی های جنبایی و زنده مانی اسپرم منجمد و یخ گشایی شده بز را بیشتر حفظ کردند. در ارزیابی اثرات اصلی و ترکیبی هر دو ماده آزمایشی روی واکنش آکروزومی اسپرم، بالاترین سطوح هر دو (15 درصد)، منجر به بروز بیشترین واکنش آکروزومی اسپرم بز شدند. همچنین در حضور آلبومین سرم گاوی و عدم حضور زرده تخم مرغ، ویژگی های عملکردی اسپرم کاهش و بالعکس، در حضور زرده تخم مرغ و عدم حضور آلبومین سرم گاوی ویژگی های عملکردی اسپرم افزایش داشته و در ترکیب آلبومین سرم گاوی با زرده تخم مرغ در حین مشاهده اثر کاهشی روی ویژگی های جنبایی و زنده مانی، اثر افزایشی در بروز واکنش آکروزومی اسپرم بز مرخز مشاهده شد. پس می توان بیان نمود که آلبومین سرم گاوی نمی تواند جایگزین مناسبی برای زرده تخم مرغ در رقیق کننده های انجمادی اسپرم بز مرخز باشد.
زهرا رضاییان موحد فردین عمیدی
این مطالعه به منظور کمک به تکنیک های ناباروری و بهبود زنده مانی و دیگر پارامترهای اسپرم، بعد از فرآیند انجماد و ذوب انجام شده است. سلنیوم ماده آنتی اکسیدانی است که وجود آن برای عملکرد طبیعی و انجام فرآیند اسپرماتوژنز ضروری می باشد. این ماده به عنوان کوفاکتور آنتی اکسیدانی منجر به کاهش رادیکالهای آزاد اکسیژن می شود و انتظار می رودکه در افزایش باروری موثر باشد. هدف ازاین مطالعه بررسی اثر سلنیوم با دوز 5 میکروگرم در لیتر بر روی پارامترهای اسپرم و آسیب dna بعداز فرآیند انجماد ـ ذوب بود. این بررسی بر روی 42 نمونه مایع سمن بارور انجام گرفت. نمونه ها به چهار قسمت مساوی تقسیم شد که دو قسمت آن شسته شده و دو قسمت دیگر شسته نشده بودند و به یک قسمت از شسته شده و یک قسمت از شسته نشده سلنیوم اضافه شده و دو قسمت دیگر مشابه بدون سلنیوم به عنوان کنترل محسوب شدند. هرچهار گروه به مدت دو هفته فریز و سپس ذوب شدند. آسیب dnaبه روش تولوئیدین بلو و پارامترهایی شامل غلظت، تحرک، مورفولوژی و زنده مانی اسپرم مورد ارزیابی قرار گرفت. به منظور ارزیابی آماری از نرم افزار spss و روش آماری one way anova استفاده شد. p<0.05 به عنوان سطح معنی دار در نظر گرفته شد. نتایج: نتایج آنالیز اسپرم نشان داد که اثر سلنیوم بر غلظت، درصد مورفولوژی، تحرک وزنده مانی نسبت به گروه کنترل بهبود یافته است. p<0.05 و همچنین آسیب dna بطور معنی داری (p<0.05) در گروه شسته شده با سلنیوم نسبت به گروه های دیگر کاهش داشته است. این نتایج نشان داد که دوز 5 میکروگرم در لیتر سلنیوم دوز مناسب برای برخی از پارامترهای اسپرم بخصوص بالا بردن درصد مورفولوژی طبیعی، تحرک، زنده مانی اسپرم می باشد و همچنین نمونه های شسته شده با سلنیوم و بدون سلنیوم نسبت به مایع سمن شسته نشده مشابه اثر بهتری بعداز فرآیند انجماد-ذوب دارا می باشد، از این روش میتوان در کلینیک های ناباروری برای افزایش کیفیت اسپرم پس از پدیده انجماد و ذوب استفاده نمود.
مهرانه یزدانی میارکلایی سهیلا ابراهیمی
مقدمه: واریکوسل شایع ترین علت ناباروری در مردان است. افزایش رادیکال های آزاد اکسیژن یکی از مهم ترین مکانیسم های آسیب رسان در واریکوسل می باشد که درفعالیت های مختلف اسپرم تاثیر منفی دارد. هدف ما از این مطالعه بررسی اثر عصاره زعفران بر پارامترهای مختلف اسپرم از جمله ، تحرک ، تعداد، مورفولوژی ، بلوغ و حیات در موش های صحرایی واریکوسلی می باشد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی از24 موش صحرایی نر نژاد wistar با میانگین وزنی 350گرم و سن 7 هفتگی استفاده گردید. حیوانات به طور تصادفی به چهار گروه 6 تایی(6n=)کنترل، شم،واریکوسلی و درمانی تقسیم شدند. در گروه شم جراحی بدون واریکوسل ودر گروه های واریکوسل و درمانی، واریکوسلبه روش جراحی القا شد.گروه درمانی واریکوسلی روزانه mg/kg 50 عصاره اتانولی زعفران به صورت داخل صفاقی تا 8 هفته دریافت کردند.پس از 8 هفته پارامترهای اسپرم (تعداد،حرکت،مورفولوژی،حیات و بلوغ)در 4گروه مورد بررسی قرار گرفت. داده ها توسط نرم افزار spss تجزیه و تحلیل شد. یافته ها: براساس نتایج به دست آمده میانگین تعداد، درصد تحرک، درصد زنده ماندن، بلوغ و مورفولوژی اسپرم در گروه واریکوسلی نسبت به گروه کنترل کاهش معنی داری نشان داد (001/0 >p). مصرف عصاره اتانولی زعفران توانست پارامترهای اسپرم را به صورت معنی داری در مقایسه با گروه واریکوسلی افزایش دهد(001/0 >p). در مقایسه درصد پارامترهای اسپرم بین نمونه های کنترل، شم و تیمار شده تفاوت معنی داری نشان نداد (05/0 <p) نتیجه گیری: به نظر می رسدعصاره اتانولی زعفران باعث بهبود پارامترهای اسپرم در موش های صحرایی واریکوسلی می شود. با توجه به وجود مقادیربالای ترکیبات آنتی اکسیدانی در زعفران احتمال داردتقویت سیستم آنتی اکسیدانی در القای این اثردرمانی دخالت داشته باشد. بدیهی است جهت روشن شدن مکانیسم عمل زعفران به تحقیقات بیشتری نیاز است.
عباس کوهی خور عباس فرشاد
هدف از این پژوهش بهبود انجمادپذیری اسپرم بز مرخز با توجه به استفاده از غلظت¬های مختلف (0، 0/75، 1/5، 2/25 و 3 میلی¬گرم در میلی¬لیتر به¬ازای 106×240 اسپرم) کلسترول بارگذاری¬شده برروی سایکلودکسترین (سی¬ال¬سی) در رقیق¬کننده تریس-سیتریک اسید-گلوکز با و بدون حضور زرده تخم مرغ (همراه با 5 درصد گلیسرول) پس از یخ¬گشایی می¬باشد. جنبایی، جنبایی پیش رونده و ویژگی¬های حرکتی اسپرم (سرعت در مسیر میانگین ، سرعت در مسیر مستقیم، سرعت در مسیر منحنی، میانگین حرکت عرضی سر، تناوب عرضی زنش، راستی مسیر حرکت، خطی بودن جنبایی) با کمک سیستم آنالیز اسپرم اندازه¬گیری شد. همچنین نرخ¬بازیابی با فرمول [100× (جنبایی پیش از انجماد/ جنبایی پس از انجماد)] محاسبه شد. وضعیت آکروزوم و زنده¬مانی (¬زنده/بدون¬آکروزوم، زنده/آکروزوم¬سالم، مرده/بدون¬آکروزوم و مرده/آکروزوم¬ سالم) نیز به روش رنگ¬آمیزی سه مرحله¬ای اندازه¬گیری شد. بخشی از نمونه هرتیمار، پس از سرد شدن تا دمای 5 درجه (پیش از انجماد در بخار ازت) و بخشی دیگر پس از انجماد، در حمام آب گرم با دمای 37 درجه به مدت 30 ثانیه قرار داده شد، تا بازیابی شود و سپس برای متغیرهای مورد نظر ارزیابی شدند. اثر سی¬ال¬سی بر متغیرهای درصد جنبایی، جنبایی پیش رونده، نرخ ¬بازیابی، اسپرم¬های زنده/آکروزوم¬ سالم، مرده/بدون¬ آکروزوم و مرده/آکروزوم¬ سالم در سطح یک درصد (0/01>p) و برای متغیرهای سرعت در مسیر منحنی، تناوب عرضی زنش ، درصد اسپرم¬های زنده/بدون¬آکروزوم در سطح پنج درصد (0/05>p) معنی¬دار بود. همچنین از نظر پارامترهای سرعت در مسیر میانگین، میانگین حرکت عرضی سر، سرعت در مسیر مستقیم، راستی مسیر حرکت و خطی بودن جنبایی در بین تیمارها تفاوتی وجود نداشت (0/05<p). نتایج نشان می¬دهد سطح 2/25 میلی گرم در میلی لیتر سی¬ال¬سی با 2/6 درصد (حجم/حجم) زرده تخم مرغ در رقیق¬کننده با مقادیر 5/46 %، 9/25 %، 53 %، 7/37 میکرون بر¬ثانیه، 7/33 میکرون¬بر¬ثانیه، 5/59 میکرون¬بر¬ثانیه، 2 میکرون، 8/8 هرتز، 89/5 %، 56/9 %، 1/3 %، 54/3 %، 3/6 % و 40/8 % به ترتیب برای جنبایی، جنبایی پیش رونده، نرخ بازیابی، سرعت در مسیر میانگین ، سرعت در مسیر مستقیم، سرعت در مسیر منحنی، میانگین حرکت عرضی سر، تناوب عرضی زنش، راستی مسیر حرکت، خطی بودن جنبایی، میزان اسپرم¬های ¬زنده/بدون ¬آکروزوم، زنده/آکروزوم ¬سالم، مرده/بدون¬ آکروزوم و مرده/آکروزوم ¬سالم، بهترین نتایج را در¬پی داشت. نتایج حاصله نشان می¬دهد که انجمادپذیری اسپرم بز مرخز با توجه به استفاده از سی¬ال¬سی همراه زرده ¬تخم ¬مرغ بطور معنی¬داری (0/05>p) در مقایسه با عدم حضور زرده تخم مرغ و سی¬ال¬سی بهبود یافت. بنابراین اضافه کردن کلسترول به غشاء پلاسمایی با کمک سی¬ال¬سی موجب کاهش تخریب¬انجمادی اسپرم بز ¬شود.