مقدمه : توکسوپلاسما گوندی یکی از شایع ترین تک یاخته های انگلی انسان و حیوان در تمام کشور های جهان است. در این مطالعه هدف تشخیص توکسوپلاسما در مغز رت های وحشی شهر تهران با استفاده از روش های رنگ آمیزی گیمسا، تزریق صفاقی و خوراکی به موش سوری بود. مواد و روش کار: تعداد 40 سر رت وحشی از مناطق مختلف تهران جمع آوری شد. از مغز رت های وحشی اسمیر روی لام تهیه و با رنگ گیمسا رنگ آمیزی شد. در روش دوم از مغز رت ها سوسپانسیون سلولی تهیه شد و به دو طریقه صفاقی و خوراکی به موش سوری تزریق و خورانده شد. در روش صفاقی، صفاق موش جهت یافتن انگل مورد بررسی قرار گرفت و در روش خوراکی با استفاده از کیت anti-igg با کونژوگه آنتی موس شرکت سیگما، میزان آنتی بادی توکسوپلاسمایی در سرم موش سوری اندازه گیری شد. یافته ها: در روش رنگ آمیزی گیمسا تمام نتایج منفی بودند. نتایج در روش دوم نیز منفی بود و انگل در صفاق موش های سوری مشاهده نشد. اما در روش تزریق خوراکی، پس از خوراندن سوسپانسیون های مغزی به موش های سوری و اندازه گیری تیتر anti-igg بعد از گذشت یک ماه در سرم موش های سوری میزان آلودگی 50% گزارش شد. نتیجه گیری: روش تهیه اسمیر روی لام با رنگ آمیزی گیمسا و روش تزریق صفاقی بافت های آلوده به کیست توکسوپلاسما به موش سوری از ارزش کمتری نسبت به روش خوراندن بافت های آلوده و تعیین تیتر anti-igg در سرم موش سوری برخوردار هستند. در این مطالعه میزان آلودگی مغز رت های وحشی با روش تعیین تیتر سرمی anti-igg 50% گزارش شد.

چکیده فلاژلین، پروتئین ساختاری فلاژل، در انتهای آمینی و کربوکسیلی خود دارای دومین های حفاظت شده ای می باشد که با اتصال به tlr5 باعث برانگیختن پاسخ های ایمنی می شوند. هدف این مطالعه تولید فیوژن پروتئین کلراتوکسین b– انتهای آمینی فلاژلین تایپ a پسودوموناس آئروژینوزا (اسید آمینه های 1-161)، ctb-flagellin(1-161)، و کونژوگاسیون آن با نانوذرات طلا و نانوژل های کیتوزانی و بررسی پاسخ های ایمنی آن ها بود. پروتئین های نوترکیب flagellin(1-161)، ctb و ctb-flagellin(1-161) تولید و آنتی ژنیسیتی آنها با وسترن بلاتینگ مورد تأیید قرار گرفت. آنتی سرم خرگوشی ضد flagellin(1-161) به طور قابل توجهی حرکت پسودوموناس آئروژینوزا m8821 را در پلیت مهار کرد. فعالیت اتصالی ctb و ctb-falgellin(1-161) با gm1-elisa تأیید شد. نانوذرات طلا پس از تولید به flagellin(1-161) و ctb-flagellin(1-161) و نانوژل های کیتوزان پس از تولید به ctb-flagellin(1-161) کونژوگه شدند. کونژوگاسیون با ftir تأیید و نمونه ها به صورت زیر جلدی به موش های balb/c تزریق شدند. آخرین رقت های igg سرمی که با flagellin(1-161) و پسودوموناس آئروژینوزا سویه های m8821 (تایپ a فلاژلین) و pao1 (تایپ b فلاژلین) واکنش مثبت داشتند، برای هر موش تعیین شد. از سرم های غیر ایمن به عنوان کنترل منفی استفاده شد. اختلاف سطح igg ضد فلاژلین در گروه های دریافت کننده پروتئین های کونژوگه یا امولسیفیه شده در ادجوانت فروند در مقایسه با گروه های دریافت کننده همان پروتئین ها بدون ادجوانت، به طور معنی داری بالاتر بود. آنتی سرم ها با سویه pao1 میانکنش قابل توجهی نداشتند. آنتی بادی ضد پروتئین های کونژوگه یا امولسیفیه شده در ادجوانت فروند در مقایسه با آنتی بادی ضد همان پروتئین ها بدون ادجوانت، به طور معنی داری درصد مرگ اپسونیک بیشتری را باعث شد (05/0 p <). در نتیجه، انتهای آمینی فلاژلین دارای دومین های فعال ایمنی می باشد و ایمنی زایی علیه آن با کمک عوامل ادجوانتی مناسب می تواند راهی برای مبارزه با عفونت های پسودوموناس آئروژینوزا باشد.

به دلیل عوارض غیر قابل جبران توکسوپلاسموزیس در افراد دچار نقص سیستم ایمنی و نوزادان متولد شده از مادران آلوده، نیاز مبرم به تکنیک های سریع، حساس و دقیق برای شناسایی توکسوپلاسما گوندی احساس می شود. روش های مولکولی به عنوان روش های حساس تر و اختصاصی-تر از رو ش های سرولوژیک در تشخیص توکسوپلاسموزیس مطرح هستند. در این مطالعه، استفاده از روش real-time nasba برای سنجش کمی بار انگلی در خون ر ت های آلوده شده با توکسوپلاسما گوندی قبل و بعد از درمان با اسپیرامایسین مورد ارزیابی قرار گرفتnasba. یک روش تکثیر rna در شرایط هم دما می باشد و روش های آشکارسازی rna وقت گیر و خطرزا هستند. این اشکالات می تواند بوسیله تکنیک real-time nasba برطرف شود. برای این منظور از molecular beacon برای آشکارسازی rna انگل توکسوپلاسما گوندی استفاده شد. molecular beacon یک توالی اولیگونوکلئوتیدی تک رشته است که دارای ساختار حلقه و لوپ است. توالی لوپ مکمل توالی هدف می باشد و توالی ساقه که در دو انتهای لوپ می باشد مکمل هم می باشد. یک ماده فلورفور در یک انتهای ساقه و در سر دیگر یک ماده خاموشگر وجود دارد. وقتی molecular beacon در محلول بصورت آزاد وجود دارد قسمت ساقه به لوپ اتصال دارد و فلورسانس از ماده فلورفور به ماده خاموشگر منتفل می شود که آن را به صورت انرژی آزاد می کند. وقتی توالی لوپ مکمل خود را پیدا کند ماده فلورفور از ماده خاموشگر جدا شده و طی تغییرات فضایی که در ماده فلورفور ایجاد می شود دیگر ماده خاموشگر نمی تواند آن را خاموش کند و ماده فلورفور انرژیی را که باعث برانگیختگی اش شده، در طول موج بالاتر رها می کند. پروب های دارای ساختار لوپ و حلقه در مقایسه با پروب های خطی از اختصاصیت پایین تری برخوردار هستند که این موضوع را به عدم وجود ساقه در این پروب ها نسبت می دهند. در این تحقیق پرایمرهای اختصاصی که دارای توالی t7 پروموتر هستند برای هدف گیری ژن b1 مربوط به تاکی زوئیت به طول قطعه bp 116 انتخاب شده و برای تکثیر rna توکسوپلاسما گوندی، از فرایند nasba و ردیابی همزمان محصول با molecular beacon استفاده گردید. real-time nasba یک روش اختصاصی همراه با حساسیت بالا می باشد. بدون شک روش حاضر یک روش سریع و حساس برای ردیابی انگل زنده و مطالعه اثربخشی داروها و واکسن ها می باشد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.