نام پژوهشگر: شهرام پور سیدی

بهینه سازی کشت بافت گیاه گوجه فرنگی وانتقال ژن t-pa انسانی به آن
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی کرمان - پژوهشکده فناوری های نو 1391
  معصومه نصیری مقدم   شهرام پور سیدی

در سه دهه گذشته فناوریهای نوین بخصوص زیست فناوری تحولات عظیمی ایجاد نموده اند و زراعت مولکولی در زمینه تولید داروهای نوترکیب مانند:( واکسنها،داروها،هورمونها و مواد صنعتی ) باعث انقلابی شگرف خواهد شد.امروزه زراعت مولکولی و تولید گیاهان تراریخته، باعث شده است که از گیاهان به عنوان بیورکتور های تولید مواد موءثر دارویی برای درمان بیماری هایی استفاده شود که تا پیش از این با استفاده از داروهای شیمیایی یا مواد زیستی بدست آمده از حیوانات یا میکروارگانیسم ها درمان می شدند. از این جهت گیاهان تراریخته می توانند به عنوان بیوراکتور جایگزین مناسبی برای سیستم های رایج تولید پروتئین های نوترکیب باشند.سکته های مغزی و قلبی اولین عامل مرگ ومیر در جوامع بشری هستندو یکی از داروهای مهم برای سکته های قلبی و مغزی، پروتئین نوترکیب t-pa (اکتیواز یا آلتپلاز ) است که به دلیل کمیاب بودن و قیمت بالا در دسترس عموم بیماران نیست. به همین علت اهمیت تولید آن در کشور فوق العاده زیاد احساس می شود.هدف اصلی از انجام این پروژه تحقیقاتی امکان سنجی تولید پروتئین نو ترکیب t-pa انسانی در گیاه گوجه فرنگی بود و بدین منظور در این تحقیق باکتری حامل ژن t-pa اهدائی از دانشگاه تربیت مدرس گروه بیوتکنولوژی دانشکده کشاورزی تحویل گرفته شد و به گیاه گوجه فرنگی ارقام (فرعون و چری زیتونی و کال جی ) انتقال داده شد. ژن هدف t-pa انسانی با استفاده از روش اگروباکتریوم به سلولهای گیاه گوجه فرنگی منتقل گردید و به دلیل حضور ژن مقاومت به آنتی بیوتیک کانامایسین سلولهای تراریخته زنده مانده وباززایی شدند. جهت بررسی بیان ژن در گیاهان تراریخته و اطمینان از تراریخته بودن آنها، از روش های مقاومت به آنتی بیوتیک، pcr و rt-pcr استفاده شد. با کشت گیاهان تراریخت روی محیط کشت ms حاوی آنتی بیوتیک کانامایسین فقط گیاهان تراریخت قادر به جوانه زنی وادامه رشد بودند. همچنین در روش های pcr و rt-pcr تکثیر ژن t-pa با آغازگر اختصاصی نشان داد که فقط گیاهان تراریخته در مقایسه با شاهد، باند تکثیر شده مربوطه (1.7kb) را نشان دادند.

بیوسنتز نانو ذرات نقره در عصاره گیاهان چای کوهی و خلر و بررسی خاصیت ضدقارچی نانو ذرات سنتز شده در این گیاهان
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید باهنر کرمان - دانشکده کشاورزی 1393
  زهرا عزیزی   شهرام پور سیدی

در کنار روش های شیمیایی از قارچ ها، باکتری ها، مخمرها، جلبک ها و به ویژه گیاهان به منظورسنتز نانو ذرات از ترکیبات معدنی استفاده شده است .در این پژوهش نانو ذرات نقره با استفاده از عصاره گیاهان چای کوهی و خلر سنتز شدند. اثرات زمان های مختلف بر سنتز نانو ذرات بررسی شد. نتایج اولیه حاکی از تغییر رنگ عصاره ها از قهوای به خرمایی و از سفید به قهوه ای بود که شاخصی اولیه در تولید نانو ذرات نقره است. آنالیز طیف سنجی uv-visible، وجود پیک جذبی در 420 نانومتر را نشان داد که حاکی از بیوسنتز نانو ذرات نقره در عصاره است. نتایج میکروسکوپ الکترونی (tem) اندازه ذرات تولید شده در عصاره را کمتر از 5 نانومتر نشان داد. آنالیز الگوی پراش اشعه ایکس(xrd) الگوی صفحات کریستالی (111)، (200)، (220) و (311) را نشان داد. طیف سنجی ftir، نقش گروه های عاملی فعال که مسئول احیاء یون های نقره در فرآیند بیوستنز بودند را نشان داد و هم چنین آنالیز اسپکتروسکوپی نشر اتمی (icp)، درصد تبدیل یون های نقره به نانو ذره نقره را در گیاهان چای کوهی و خلر به ترتیب 73/99 و 67/ 99 درصد تعیین کرد. بررسی خاصیت ضد قارچی نانو ذرات نقره سنتز شده بر روی دو قارچ dothiorella sarmentorum و spencermatinsia vticola، در قالب طرح کاملا تصادفی و به روش حلقه بازدارندگی انجام شد، و این نتایج نشان داد که اثر بازدارندگی نانو ذرات نقره سنتز شده توسط عصاره گیاهان چای کوهی و خلر بر روی قارچ های مورد بررسی اختلاف معنی داری در سطح یک درصد داشت و عصاره های حاوی این نانوذرات توانست خاصیت ضد قارچی نسبت به عصاره شاهد از خود نشان دهند.