نام پژوهشگر: شیرین برجعلی لو
شیرین برجعلی لو علیرضا زمردی پور
عامل تحریک کننده رده گرانولوسیت -ماکروفاژ (gm-csf)یکی از عوامل رشد خونساز و تنظیم کننده خونسازی می باشد که تولید و فعال سازی گرانولوسیت ها و ماکروفاژها را از سلول های پیش ساز کنترل می نماید.gm_csf کاربردهای دارویی متعددی دارد و به دلیل برخی محدودیت ها در بدست آوردن این پروتئین از منابع طبیعی ، تولید آن در سیستم های بیان ژنی هم ساخت ترجیح داده می شود.به منظور مطالعه بیان پری پلاسمی gm_csf انسانی در e.coil ، dna ی hgm-csf به داخل دو پلاسمید بیان کننده که دارای ترادف نشانه pelbبوده و یکی مجهزبه پروموتر t7و دیگری مجهز به پروموتر lacبود وارد گردید.cdna ی hgm_csf با روش pcrو با استفاده از دو آغازگر اختصاصی که با یکی از جایگاهای برش ncol یا bamhiدر انتها 3 آنها طراحی شده بودند تکثیر شد.الگوی پروتئینی به دست آمده از کل سلول سیتوپلاسم و پری پلاسم ( تهیه شده با شوک اسمزی ) باکتریهای نوترکیب ، نشان داد که rhgm_csf در فضای پری پلاسمی تجمع می یابد که توسط ترادف نشانه pelb هدایت می شود.نتایج نشان دادند که سطح بیان rhgm+csfتحت کنترل پروموتر t7 می تواند به حدود 43 درصد کل پروتئین باکتریایی برسد که بسیار بالاتر از سطح بیان hgm_csf تحت کنترل پروموتر lac می باشد.