نام پژوهشگر: مهوش خدابنده شهرکی

جداسازی اجزاء پروتئینی آرتمیا اورمیانا و بررسی اثرات ممانعت ازپیری این عوامل در سلولهای فیبروبلاست انسانی در محیط کشت سلولی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان البرز - دانشکده کشاورزی 1393
  ندا واصلی حق   محمد علی ابراهیمی

تغییر در ساختار پروتئین در طول پیری مسئول دگرگونی مرفولوژی و تغییر ساختار پوست به صورت ایجاد چروک، از دست دادن خاصیت ارتجاعی و خشکی می شود.استرس ، اشعه ماورای بنفش یکی از عواملی که بر کلاژن ، الاستین و ملانوسیت اثر گذاشته و باعث ایجاد چروک ، لکه هایی بر روی پوست و خشکی آن می شود. تحقیق در مورد عوامل ممانعت کننده از پیری سلولی گزینه جالب توجهی برای استفاده در صنایع بهداشتی آرایشی در بیوتکنولوژی است. آرتمیا خرچنگ دریایی متعلق به آب های شوربوده و بیشترین توانایی تحمل استرس را در بین موجودات چند سلولی دارا است. آرتمیا به شرایط سخت آب مانند کاهش فشار اکسیژن و دماهای بالا مقاوم است. ناپلوئی (آرتمیای تازه از تخم در آمده) به علت خصوصیات تغذیه ای مواد غذایی مناسبی برای محیط های آبی فراهم آورده و هم چنین در ایران به طور سنتی موارد مصرف دارویی دارد. مشخص شده که عصاره این جاندار حاوی دی گوانوزید تترا فسفات می باشد که جاندار از آن به عنوان منبع تولید انرژی استفاده می کند . این ترکیب یک ماده بیولوژیک فعال است که سبب تحریک متابولیسم سلولهای پوستی و افزایش تکثیر سلولهای اپیدرم می گردد. از آنجائیکه آرتمیا اورمیانا گونه غالب موجود در دریاچه ارومیه است و بررسی اولیه نشان می دهد که تاکنون مطالعه ای در زمینه اثرات ضد پیری آرتمیا بر روی سلولهای پوست انجام نگرفته است و با توجه به مصرف روز افزون عصاره آرتمیا در لوازم بهداشتی آرایشی بخصوص محصولات ضد پیری سلولی و جوان کننده پوست، بررسی عوامل مولکولی موجود در عصاره آرتمیا اورمیانا بومی ایران بر روی سلولهای فیبروبلاست در سطح آزمایشگاه ضروری به نظر می رسد. سلولهای فیبروبلاست سلولهای چسبنده ای هستند که در محیط کشت dmem با ?? ? fbs رشد می کنند. در این تحقیق آرتمیا در دمای c ?28و8 ph= در آب دریای مصنوعی درحال بهم خوردن برای مدت ?? ساعت انکوبه و hatch گردید. عصاره گیری از ناپلوئی ها با روش سونیکاسیون انجام و عصاره آرتمیا استخراج شد. خالص سازی عصاره خام آرتمیا با ستون کروماتوگرافی تعویض یونی با رزین de52 سفارز انجام گردید. سپس سلولهای فیبروبلاست با رقت های متفاوتی از اجزا بدست آمده از کروماتوگرافی و عصاره خام آرتمیا تیمار گردیدند. تست های انجام شده نشان داد که به ترتیب اجزاء 5و7و6 بدست آمده از ستون کروماتوگرافی اثر افزایشی بر روی رشد(تستmttو brdu)، اثر افزایشی بر روی سنتز کلاژن (تست rt-pcr)و ضد پیری(x-gal) داشته به طوری که جزء 5 جدا شده از ستون بیشترین افزایش سپس اجزاء7و6 بیشترین اثر و دیگر اجزاء(2و3و4) اثر کاهشی بر روی رشد داشته اند

بررسی تاثیر ترانسفروزوم حاوی هورمون رشد بر رشد و تقسیم فیبروبلاست های درمی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1392
  مینو عظیمی   عبدالخالق دیزجی

چکیده فارسی مولکول های دارویی پروتئینی به طور معمول از طریق تزریق وارد بدن میشوند. تاکنون تلاش های متعددی برای دستیابی به روش های غیرتهاجمی جهت تجویز سیستمیک پپتیدها صورت گرفته است،یکی از مسیرهای رسیدن مولکول های دارویی به جریان سیستمیک بدن، جذب پوستی است، اما به دلیل ماهیت واکنش پذیر و تخریب پذیر پپتیدها و پروتئین ها و همچنین بزرگ بودن اندازه مولکولی آنها، طراحی حامل های دارویی مناسب جهت تجویز غیرتزریقی آنها با مشکلات فراوانی همراه بوده است.هورمون رشد پروتئینی با وزن مولکولی 22 کیلو دالتون میباشد، سطح ترشح این هورمون مانند سایر هورمون های بدن، با افزایش طول عمر کاهش میابد. یکی از تاثیرات کاهش هورمون رشد، کاهش سنتز پروتئین و در نتیجه، کاهش رشد مو و ناخن، کاهش سنتز کلاژن و پیری پوست میباشد. به علاوه هورمون رشد، از طریق راه اندازی مسیر سیگنالینگ سنتز پروتئین توسط igf-1 در بهبود زخم تاثیر گذار میباشد. در این مطالعه، از یک سیستم دارورسانی با استفاده از وزیکول های لیپیدی فوق العاده تغییرشکل پذیر(ترانسفرزوم) جهت تجویز سیستمیک از طریق پوست استفاده گردیده است. ترانسفروزوم ها به دلیل خصوصیت الاستومکانیکی فوق العاده خود، قادرند از منافذی بسیار کوچکتر از اندازه خودشان عبور کرده و داروی همراه خود را از پوست عبور دهند. با توجه به اینکه یکی از مهمترین سلول های پوست که در سنتز کلاژن و پیری پوست و همچنین در بهبودزخم تاثیرگذار است، سلول های فیبروبلاست میباشد، در این تحقیق غلظت های موثر هورمون رشد محصور در ترانسفرزوم بر روی رشد و تقسیم سلول های فیبروبلاست با استفاده از تست های mtt و brduتعیین شد، اثر غلظت های موثر هورمون بر روی بیان کلاژن iii از طریقreal-time pcr و بر بیان کلاژن i از طریق real-time pcr و وسترن بلات مورد بررسی قرار گرفت، نتایج نشان داد که در غلظت های موثر هورمون رشد محصور در ترانسفرزوم، افزایش بیان ژن کلاژن i و کلاژن iii مشاهده میشود.

تجزیه زیستی بیس فنل a در محیط شور بوسیله باکتری های بومی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1393
  ساسان جهانشاهی   مهوش خدابنده شهرکی

هیدروکربن های آروماتیک چند حلقه ای (pahs) آلودگی های رایج زیست محیطی هستند که توسط فعالیت های بشری و منابع طبیعی ایجاد می گردند. با این وجود سازمان بهداشت جهانی (who) بزرگترین منشا pahها را فرایند های صنعتی و سایر فعالیت های انسانی می داند. این ترکیبات به دلیل توان بالای سمیت، جهش زایی و سرطان زایی موجب نگرانی های عمده ای شده و در فهرست آلاینده های درجه اول آژانس حفاظت محیط زیست آمریکا (us epa) و اتحادیه اروپا (eu) قرار گرفته اند. هدف این تحقیق زیست پالایی بیس فنلa به عنوان یک هیدروکربن آروماتیک چند حلقه ای در نظر گرفته شد. ابتدا از 5 منطقه صنعتی ( آلوده به ترکیبات آروماتیک ) و شور، تحت شرایط استاندارد نمونه برداری شد. غربالگری طی 2 مرحله انجام شد. طی غربالگری اولیه از مناطق نمونه برداری شده، 8 جدایه حاصل گردید. جدایه های حاصل از غربالگری اولیه و همچنین جدایه هایی با سابقه تجزیه ترکیبات آروماتیک و نمک دوست تحت غربالگری ثانویه قرار گرفتند. طی غربالگری ثانویه یک جدایه (جدایه نمونه پساب پتروشیمی ماهشهر) به عنوان جدایه برتر انتخاب شد. این جدایه قادر به رشد در محیط معدنی نمکی حاوی mg/l 300 بیس فنلa (به عنوان تنها منبع کربن و انرژی) در حضور g/l nacl 40 می باشد. نتایج توالی یابی قطعه 16s rrna نشان داد که جدایه برتر بیشترین شباهت (99%) را با سودموناس چنگدونسیس سویه mbr دارد، از این رو جدایه برتر سودوموناس سویه ykj نام گذاری شد. سویه ykj قادر به رشد در تمام دماهای مورد مطالعه (25 تا 40 درجه سانتی گراد) بوده و طیف ph قابل تحمل این جدایه، 9-6 است و شرایط مناسب رشد ?c 30t= و 7 ph= تعیین گردید. مقدار cod محیط کشت از مقدار اولیه o2/l mg 2/655 بعد از گذشت 36 ساعت در حضور سویه ykj به o2/l mg 2/109 کاهش یافت و پس از این مدت، مقدار cod تا 48 ساعت تقریبا ثابت ماند. آنالیزهای انجام شده با دستگاه hplc نشان داد طی 48 ساعت علاوه بر مصرف کامل بیس فنلa، تمامی متابولیت های حاصل طی تجزیه زیستی بیس فنلa بوسیله سویه ykj، تجزیه شده و تنها یک متابولیت در محیط قابل رویت است. سویه ykj نسبت به آنتی بیوتیک کلرامفنیکل مقاوم می باشد، همچنین مقاومت نسبی به آمپی سیلین داشته، ولی نسبت به آنتی بیوتیک های ریفامپیسین، کانامایسین و تتراسایکلین حساس می باشد. با توجه به نتایج کسب شده با دستگاه های hplc و gc-ms که در مجموع منجر به شناسایی هفت متابولیت (طی تجزیه زیستی بیس فنلa) شد، مسیری به عنوان مسیر متابولیکی تجزیه بیس فنلa در سویه ykj پیشنهاد گردید که مطابق با مسیر متابولیکی گزارش شده در پایگاه اطلاعاتی kegg است.