نام پژوهشگر: غلامرضا اسدی کرم
محدثه چهکندی نیره عسکری
اپیوئید ها به عنوان موثرترین ضد درد های شناخته شده هستند که در سال های اخیر اثرات ضد التهابی آنها نیز گزارش شده است. نتایج حاصل از مطالعات نشان داده است که اپیوئید ها به جز اثر بر سیستم های درد و ضد دردی، سطوح برخی فاکتورهای بیوشیمیایی خون را نیز دستخوش تغییر می سازند. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثر مصرف حاد و مزمن مرفین بر برخی فاکتورهای سرمی و بیان ژن های گیرنده های اپیوئیدی مو و کاپا در سطح نخاع موش صحرایی نر در حضور و غیاب التهاب ناشی از کاراژینان است. تزریق مرفین به مدت هشت روز با دوز 10 میلی گرم به ازای کیلوگرم وزن بدن باعث ایجاد تحمل به اثرات ضد دردی گردید. ایجاد التهاب با تزریق ماده ی التهاب زای کاراژینان 5/1% (لامبدا) به صورت کف پایی انجام شد. برای بررسی اثر هورمون های جنسی، گروه هایی از موش های صحرایی های نر گنادکتومی شده و سه هفته پس از جراحی تحت تزریق حاد و مزمن مرفین و نیز التهاب ناشی از کاراژینان قرار گرفتند. پس از استخراج rna و ساخت cdna، تکثیرcdna با استفاده ازپرایمرهای اختصاصی طراحی شده و حاصل شدن تک باند بر روی ژل الکتروفورزبا سایز مورد نظر، بررسی میزان بیان ژن با استفاده از ماسترمیکس سیبرگرین و دستگاه real time pcr صورت گرفت. مقایسه بیان ژن ها با روش ??ct صورت گرفت. سنجش فاکتورهای بیوشیمیایی گلوکز، کلسترول، تری گلیسرید، اوره و اسیداوریک با استفاده از کیتهای سنجش درمان کاو، انجام شد. نتایج مولکولی نشان داد که در کل التهاب ناشی از کاراژینان، و مصرف حاد مرفین موجب افزایش بیان گیرنده های اپیوئیدی مو و کاپا شده است.بعلاوه، مصرف حاد و مزمن مرفین در حضور التهاب ناشی از کاراژینان، موجب کاهش بیان گیرنده ها نسبت به گروهی که کاراژینان را به تنهایی دریافت کرده اند شده است ،نتایج نشان می دهدکه در کل گنادکتومی موجب کاهش اثرات حاد و مزمن مرفین در بیان ژن های مو وکاپا در حضور و عدم حضور التهاب شده است. نتایج سنجش فاکتورهای خونی نیز نشان داد که مصرف مرفین موجب افزایش سطوح گلوکز، کلسترول واوره خون شده در حالی که کارازینان یک نقش مهاری در اثرات مرفین بر این فاکتورها اعمال کرده است. عدم حضور هورمون های جنسی نیز موجب کاهش اثرات تیمارهای مختلف با مرفین در فاکتورهای خونی گروه های مختلف می شود. کلمات کلیدی: هورمون های جنسی، مرفین، التهاب، گیرنده های مو و کاپا، فاکتورهای بیوشیمیایی خون.
زهرا جمالی غلامرضا اسدی کرم
چکیده ندارد.
غلامرضا اسدی کرم محمدجواد رسایی
پروتئیناز 3 یک نوتروفیل سرین پروتناز و به عنوان یک اتو آنتی نوتروفیل سیتوپلاسمیک اتوآنتی بادیها که در سرم افراد با بیماری گرانولوماتوز وگنر دیده می شود، می باشد. فرم خالص شده این پروتئیناز جهت مطالعه این بیماران بسیار حائز اهمیت است . در این تحقیق دو نوع pr3 انسانی بصورت نوترکیب تهیه شد. بخشی از pr3cdna که فرم فعال راکد می کند انتخاب و با انجام واکنش نسخه برداری معکوس و واکنش زنجیری پیوسته بر روی rna سلولهای u937 ، با پرایمرهای خاص cdna های مورد نظر تهیه گردید. به منظور اینکه pr3 های ساخته شده در محیط کشت ترشح شوند یک توالی علامت دهنده ترشحی در جلو cdna های pr3 اضافه گردید و سرانجام دو نوع توالی سیگنال ساخته شد. در یکی از آنها توالی سیگنال و pr3 مستقیما" به یکدیگر متصل شده اندspr3 و در دیگری 6 جفت باز اضافی بین s و pr3 وجود داردsapr3-spr3-(sapr3) در داخل وکتور بیان کننده pme18 کلون شدند و pme18-s-apr3-pme18-s-pr3 های حاصل در داخل e.coli الکتروپوریت گردیدند. بعد از جداسازی، تخلیص و مطمئن شدن از صحت توالیهای spr3 و sapr3 ، وکتورها در داخل cho-cells الکتروترانسفرم شدند. پس از 10 روز حضور پروتئینازهای نوترکیب (rapr3,rpr3) در محیط کشت تایید و فعالیتشان در برابر سوبسترای اختصاصی اندازه گیری شد. مقدار rpr3 و rapr3 در محیط کشت به ترتیب 10ng/ml و 12ng/ml بود. pr3 های نوترکیب دارای فعالیت آنزیمی بوده و هر دو همانند نوع طبیعی توسط c-anca شناخته می شوند.