نام پژوهشگر: داریوش مینایی

ررسی کینتیکی مهار شدن آنزیم آلکالین فسفاتاز
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - پژوهشکده علوم زیستی 1390
  لیلا عزیزی   داریوش مینایی

چکیده آلکالین فسفاتاز دسته ای از آنزیم های هیدرولاز است که قادر است گروه فسفات را از سوبسترا جدا کند.این آنزیم در بافتهای مختلف دارای ایزوآنزیم های مختلفی است.سنجشآنزیم میتواند کمک به تشخیص برخی از بیماریها به خصوص بیماری کبدی نماید. ترامادول یک دارو با اثرات تسکینی قوی است که بر روی دریافت کننده های گابا، سروتونین وآدرنالین سیستم عصبی مرکزی موثر است. در بزرگسالان ترامادول برای تسکین دردهای شدید به کار می رود و امروزه به طور گسترده استفاده می شود. در این تحقیق برای اولین بار تاثیر داروی ترامادول بر روی آنزیم آلکالین فسفاتاز بررسی گردید. نتایج ما نشان داد داروی ترامادول سبب مهار فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز می شود. رسم منحنی عکس سرعت علیه غلظت نشان داد که در حضور غلظتهای متفاوتی از ترامادول مهار کنندگی از نوع غیر رقابتی می باشد. مقدار km وvmax آنزیم در غیاب دارو به ترتیب در حدود mm 0.282 و mm/min 25/0 تعیین گردید ، در حالیکه در حضور ترامادول km ثابت ولی سرعت ماکزیمم تغییر کرد که مهار کنندگی از نوع غیر رقابتی را مشخص کرد. مقدارki ترامادول با رسم منحنی دیکسون، در حدود 0.19mmمشخص شد و میزان ic50دارو در حدود 0.09mm محاسبه گردید. در این تحقیق آنزیم آلکالین فسفاتاز خالص گردید و تغییر کانفورماسیون آن در حضور و غیاب ترامادول توسط دستگاه فلورسانس بررسی گردید. نتایج به دست آمده از دستگاه فلورسانس دلالت بر آن دارد که پس از اتصال ترامادول تغییر ساختاری ناشی از جابجا شدن باقی مانده های تیروزین وتریپتوفان به چشم خورد به طوریکه هیپو کرومیسیتتی در گراف بدست آمده پس از اتصال ترامادول به آنزیم دیده شد.