استخراج و اندازه گیری هورمون های استروژنی استرون، 17- بتا استرادیول و دی اتیل استیل بسترول در نمونه های آبی توسط روش میکرو استخراج مایع-مایع پخشی (dllme) و کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا (hplc) انجام شد. به منظور بهینه سازی شرایط استخراجdllme ، اثر هفت فاکتور آزمایشی: حجم و نوع حلال استخراج کننده و پخش کننده، زمان استخراج، قدرت یونی وph نمونه بر درصد بازیابی ترکیبات آزمایشی مورد نظر بررسی گردیده و شرایط بهینه بدست آمد. تحت شرایط بهین? استخراج (0/80 میکرو لیتر حلال استخراج کننده کربن تترا کلرید، 25/1 میلی لیتر حلال پخش کننده استن، 12% وزنی- وزنی نمک nacl و 0/10ph = ) درصد بازیابی و فاکتور غنی سازی به ترتیب % 2/94-2/85 و 5/78-0/71 بدست آمدند. جداسازی و اندازه گیری استروژن ها توسط روش hplc با استفاده از فاز متحرکی شامل 0/50 درصد حجمی- حجمی حلال آلی استونیتریل، 0/2 درصد حجمی- حجمی تترا هیدروفوران و 0/48 درصد حجمی- حجمی آب دو بار تقطیر شده با آشکارساز uv در طول موج 245 نانومتر صورت گرفت. حد آشکارسازی و محدوده خطی در اندازه گیری استروژن ها ، به ترتیب، g/lµ 10/0-08/0 و g/lµ 0/500-3/0 بودند. انحراف استاندارد نسبی روش توسط پنج اندازه گیری مستقل استروژن ها در نمونه های آبی تعیین و در محدود? % 2/3-4/2 بود