تخلیص نوکلئوپروتئین ویروس h9n2 آنفلوانزای پرندگان

پایان نامه
چکیده

بیماری آنفلوانزای پرندگان سالانه خسارت اقتصادی فراوانی به صنعت طیور در سراسر دنیا وارد می کند. آنفلوانزای پرندگان بیماری بسیار واگیرداری است که موجب بروز علایم در سیستم های تنفسی، گوارشی و اعصاب در طیف وسیعی از پرندگان می گردد و قابل انتقال به پستانداران از جمله انسان می باشد. ویروس آنفلوانزا، ویروسی پلی مورفیک از خانواده ارتومیکسوویروس ها است و این ویروس با ژنوم rna تک رشته ای، دارای 8 نوع پروتئین ساختاری و 2 نوع پروتئین غیر ساختاری بوده و نوکلئوپروتئین (np) از پروتئین های ساختاری و داخلی ویروس می باشد. این تحقیق به منظور معرفی روش ساده و کاربردی و سریع جهت جداسازی نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزای پرندگان صورت پذیرفت. پروتئین خالص شده را می توان به منظور تهیه آنتی سرم اختصاصی نوکلئوپروتئین استفاده نمود. به این منظور ابتدا ویروس آنفلوانزای پرندگان n_2 h_9 جداشده از مایع الانتوئیک تخم مرغهای جنین دار 10 روزه را سانترفیوژ و با استفاده از پلی اتیلن گلیکول 6000 و با وزن حجمی 10% و گرادیانت سوکوروز در شیب 60-30 درصد ویروس تخلیص گردید. با استفاده از دستگاه preparative electrophoresis(prepcell 491) پروتئین های ویروس آنفلوانزا جداسازی و به صورت فراکسیونهایی تهیه شد. میزان جذب پروتئین فراکسیون ها با دستگاه اسپکتوفوتومتر در nm280 مشخص شده و فراکسیونهای دارای جذب، لیوفریزه گردید و سپس آنالیز پروتئین با sds-page و رنگ آمیزی نیترات نقره مشخص نمود که نمونه هایی بدست آمده موردنظر حاوی نوکلئوپروتئین خالص بوده و عاری از سایر پروتئینهای ویروس است. نتایچ بررسی فراکسیونهای لیوفریزه شده حاوی نوکلئوپروتئین روی ژل اگار عدم حضور rna ژنوم ویروس همراه با نوکلئوپروتئین و خلوص بالای نوکلئوپروتئین را نشان داد.

منابع مشابه

بررسی هم‌خوانی دو نوع پرایمر RT-PCR جهت تشخیص ویروس آنفلوانزای پرندگان (H9N2)

هدف از انجام این تحقیق استفاده از دو نوع پرایمر RT-PCR برای تشخیص ویروس آنفلوانزای H9N2 پرندگان و مقایسه هم‌خوانی این دو روش نسبت به همدیگر بود تا مشخص شود کدام روش در رقت‌های متوالی تهیه شده دارای آستانه تشخیص بیشتری است. برای این منظور میزان EID50 ویروس آنفلوانزایی که با استفاده از کشت و کیت‌های تجاری مورد تایید قرار گرفته بود، با استفاده از روش Reed and Muench مشخص شد. تیتر ویروس 106  EID50 ...

متن کامل

مقایسه ایمنی زایی باکتری حرارت دیده و سونیکه اشریشیا کلی و سروتیپ h9n2 ویروس آنفلوانزای پرندگان

کلی باسیلوز به تعدادی از عفونت های موضعی یا سیستمیک گفته می شود که توسط اشریشیا کلی ایجاد می گردند و خسارات زیادی به صنعت طیور وارد می کند. درمان بیماری کلی باسیلوز از طریق تجویز آنتی بیوتیکها صورت می گیرد که سبب تحمیل هزینه های سنگین به تولید کنندگان و افزایش مقاومت میکروبی و کاهش کیفیت گوشت می شود. واکسیناسیون به عنوان موثرترین راه کنترل این بیماری مطرح است. بیماری آنفلوانزای پرندگان یک بیمار...

بررسی جراحات هیستوپاتولوژیک ناشی از آلودگی تجربی همزمان ویروس آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 و باکتری اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال

زمینه مطالعه: علی‌رغم اینکه ویروس آنفلوانزای تحت تیپ H9N2 و باکتری اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (ORT) به تنهایی قادر به ایجاد جراحات هیستوپاتولوژیک در پرندگان عفونی هستند. اما تا به حال، مطالعه‌ای در خصوص جراحات بافتی ناشی از این عوامل بیماریزا به صورت همزمان در جوجه‌های عاری از عوامل بیماریزای خاص (SPF) انجام نشده است. هدف: هدف از این مطالعه بررسی نوع، شدت و میزان جراحات بافتی عفونت همزمان ویرو...

متن کامل

شجره شناسی ویروس آنفلوانزای پرندگان ‌H9N2 جدا شده از گله‌های گوشتی ایران براساس ژن پلی مراز ‌ PB1

زمینه مطالعه :‌ ‌آنفلوانزای پرندگان ‌H9N2 برای اولین بار از بوقلمون در سال 1966 در ایالات متحده جدا و سپس در اروپا و آسیا انزئوتیک گردید. این ویروس برای اولین بار در ایران در سال 1377 در جوجه‌های گوشتی استان قزوین جدا سازی گردید و هم اکنون در کشور اندمیک است. پروتئین پلی مراز ‌1PB یکی از پروتئین‌های این ویروس است که نقش مهمی در حدت و تعیین محدوده میزبان ایفا می‌کند. هدف:‌ ‌هدف از این مطالعه برر...

متن کامل

بررسی ژنتیکی مقاومت به آمانتادین در ویروس آنفلوانزای H9N2 پرندگان در ایران بین سال های 1377 تا 1388

در سال 1377 یک اپیدمی از آنفلوانزای پرندگان در ایران شیوع پیدا نمود که عامل بسیاری از تلفات در مرغداری­های ایران گشت. تحقیقات به­عمل آمده نشان داد که عامل پیدایش این همه­گیری، ویروس آنفلوانزای پرندگان با تحت تیپ H9N2 می­باشد. به جهت درمان و پیشگیری عفونت­های ناشی از ویروس­های آنفلوانزای A در جهان، داروهای ضد آنفلوانزای آمانتادین و ریمانتادین (آدامانتان­ها) مورد استفاده قرار می­گرفتند که با افزا...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان البرز - دانشکده کشاورزی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023