بررسی میان کنش کربنیک انیدراز ii انسانی با رنگ سان ست یلو

کربنیک انیدرازها (1 .1 .2 .4(cas, ec آنزیم های مهمی هستند که هیدراسیون برگشت پذیر دی اکسید کربن به یون های بی کربنات و هیدروژن را کاتالیز می کنند. مکانیسم های کاتالتیک و مهاری این آنزیم ها به خوبی شناخته شده و در طراحی مهارکننده های قوی که برخی از آن ها دارای کاربردهای بالینی مهمی می باشند، کمک شایانی نموده است. در این مطالعه، میان کنش سان ست یلو به عنوان یک رنگ غذایی (سولفوناتی) با کربنیک انیدراز ii انسانی توسط روش های مختلف از قبیل اسپکتروسکوپی مریی- فرابنفش، فلورسانس و دورنگ نمایی دورانی در بافر تریس mm 50 با 75/7 ph مورد بررسی قرار گرفت. نتایج سینتیکی نشان داد که سان ست یلو به صورت رقابتی و از نوع ساده خطی فعالیت استرازی کربنیک انیدراز را مهار می کند. تعیین آب گریزی سطحی پروتئین (psh) توسط 1- آنیلینو نفتالن- 8- سولفونیک اسید آشکار ساخت که psh آنزیم در حضور سان ست یلو کاهش یافته است. تیتراسیون آنزیم و کمپلکس آنزیم- رنگ با n- بروموسوکسینیمید پیشنهاد می کند که تعداد تریپتوفان های در دسترس حلال در حضور سان ست یلو کاهش می یابد. سرعت تجمع گرمایی آنزیم در حضور سان ست یلو کاهش یافت. همچنین مطالعات غیر طبیعی شدن القا شده توسط اوره نشان داد که پایداری ترمودینامیکی آنزیم در حضور سان ست یلو افزایش یافت. نتایج بررسی طیف cd در ناحیه فرابنفش دور آشکار ساخت که حضور سان ست یلو سبب افزایش محتوای مارپیچ آلفا در کربنیک انیدراز ii انسانی شده است. طیف cd در ناحیه فرابنفش نزدیک نشان داد که در حضور رنگ، انعطاف پذیری در ساختار سوم آنزیم کاهش می یابد. آنالیز اشترن- ولمر در دماهای متفاوت نشان داد که خاموشی فلوئورسانس ذاتی کربنیک انیدراز ii انسانی از نوع مکانیسم استاتیک می باشد. بررسی پارامترهای ترمودینامیکی اتصال نشان داد که پیوندهای هیدروژنی و واندر والس نقش مهمی در میان کنش سان ست یلو با آنزیم دارند. بنابراین اتصال سان ست یلو به کربنیک انیدراز ii انسانی از طریق القای فشردگی در ساختار آنزیم سبب افزایش پایداری سینتیکی و ترمودینامیکی آنزیم می شود.