تهیه و تخلیص آنتی ژن دو اپیتوپی شبه numa واکنشدهنده با آنتی بادی تجاری

پایان نامه
چکیده

سرطان مثانه یکی از انواع بدخیمی های مجاری ادراری است که شیوع آن در مردان 4 برابر بیشتر از زنان می باشد و تشخیص زودهنگام آن در درمان موثر و کنترل بیماری نقش بسزایی دارد. روش های تشخیصی که بر اساس شناسایی آنتی ژن های محلول رها شده در نمونه ادرار هستند، می توانند جایگزین روش های شناسایی تهاجمی شده و همچنین میزان اختصاصیت و حساسیت بالاتری از خود نشان دهند. nmp22 بخشی از پروتئین های اسکلت هسته ای می باشد و نقش مهمی در مکانیسم همانندسازی dna، رونویسی، پردازش rna و تنظیم بیان ژن دارد. این پروتئین پس از آپوپتوز سلول، به ادرار رها شده و غلظت آن در ادرار افراد مبتلا به سرطان مثانه 20 تا 80 برابر بیشتر از نمونه های افراد سالم می باشد. در این مطالعه، پروتئین نوترکیب nmp22 دارای نواحی آنتی ژنیک به منظور ایجاد پاسخ ایمنی در مدل حیوانی طراحی، بیان و تخلیص شد. مواد و روش ها: توالی ژنتیکی پروتئین مورد نظر از پایگاه اطلاعاتی genbank برداشته شد و نواحی اپیتوپی آن بر اساس مقالات و همچنین با استفاده از پایگاه های اطلاعاتی پروتئین انتخاب شده و 300 آمینواسید انتخابی برای بیان در میزبان e.coli سویه bl21 بهینه شده و برای سنتز به شرکتgenscript سفارش داده شد. این قطعه در وکتور بیانی pgs21a دارای دنباله هیستیدینی دریافت شد و به باکتری مستعد bl21a انتقال داده شد و بیان صورت گرفت. sds-page انجام شد . وسترن بلاتینگ جهت تایید بیان و همچنین الایزا جهت بررسی واکنش با آنتی بادی تجاری انجام شد . آنتی ژن تخلیص شده به منظور تولید آنتی بادی پلی کلونال به حیوان تزریق شد. یافته ها: پروتئین مورد نظر به خوبی بیان شده و باند63 کیلودالتونی با استفاده از sds-page مشاهده شد در حالیکه نمونه های القا نشده و باکتری بدون پلاسمید فاقد باند در ناحیه موردنظر بود. وسترن بلاتینگ با استفاده از anti-his tag بیان پروتئین را تایید کرد. الایزا نیز واکنش اختصاصی آنتی ژن و آنتی بادی تجاری anti-numa را در مقابل نمونه کنترل منفی نشان داد .پس از تزریق به حیوان، آنتی بادی پلی کلونال ضد t-numa با تیتر مناسب حاصل شد. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب t-numa می تواند به عنوان یک کاندید مناسب جهت طراحی ابزار تشخیصی برای سرطان مثانه با استفاده از نمونه ادرار مورد استفاده قرار بگیرد. کلمات کلیدی: سرطان مثانه، پروتئین نوترکیب، t-numa

منابع مشابه

تهیه و تخلیص آنتی بادی آنتی ایمونوگلوبولین Y از خرگوش

سابقه و هدف: آنتی بادی های زرده تخم مرغ (IgY) نقش فزاینده ای به عنوان جایگزینی آنتی بادی های پلی کونال پستانداران ایفا می کنند. این آنتی بادی ها در پیشگیری، تشخیص و درمان بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرند. آنتی بادی های آنتی IgY در سنجش های ایمنی و درمان کاربرد دارند. هدف از این تحقیق تهیه و تخلیص آنتی ایمونوگلوبولین Y از سرم خرگوش و تایید فعالیت آن بود. مواد و روش ها: در این مطالعه IgY و سا...

متن کامل

تهیه و تخلیص آنتی بادی آنتی ایمونوگلوبولین y از خرگوش

سابقه و هدف: آنتی بادی های زرده تخم مرغ (igy) نقش فزاینده ای به عنوان جایگزینی آنتی بادی های پلی کونال پستانداران ایفا می کنند. این آنتی بادی ها در پیشگیری، تشخیص و درمان بیماری ها مورد استفاده قرار می گیرند. آنتی بادی های آنتی igy در سنجش های ایمنی و درمان کاربرد دارند. هدف از این تحقیق تهیه و تخلیص آنتی ایمونوگلوبولین y از سرم خرگوش و تایید فعالیت آن بود. مواد و روش ها: در این مطالعه igy و سا...

متن کامل

تهیه و تخلیص آنتی بادی منوکلونال علیه آنتی ژن لیپوآرابینومان مانوزیله مایکوباکتریوم بویس

مقدمه و هدف: لیپوآرابینومان مانوزیله (manlam)­ از آنتی­ژن های گلیکولیپیدی است که درصد قابل توجهی از دیواره سلولی باکتری مایکوباکتریوم بویس ب ث ژ را تشکیل می دهد. نظر به اینکه تولید آنتی بادی منوکلونال آن، به­ویژه در طراحی کیت تشخیص سریع بیماری سل  کاربردهایی فراوان دارد، لذا هدف از تحقیق حاضر، تولید آنتی بادی منوکلونال ضد این آنتی­ژن می باشد.  مواد و روش کار: پس از تزریق های منظم موش های balb/c...

متن کامل

تهیه و تخلیص آنتی بادی علیه استرپتوکک موتان از زرده تخم مرغ

سابقه و هدف: استرپتوکک موتان سروتیپ c عامل باکتریایی اصلی در پوسیدگی دندانهای انسان است. هدف از تحقیق تولید و خالص سازی آنتی بادی علیه استرپتوکک موتان سروتیپ c از زرده تخم مرغ بود. مواد و روشها: در این تحقیق آزمایشگاهی استرپتوکک موتان M T 8148 (سروتیپc ) بعنوان آنتی ژن استفاده شد. مرغها با باکتری- کشته شده با فرمالین- از طریق داخل عضلانی ایمونیزه و تخم مرغها روزانه جمع آوری شدند. ایمونوگلوبین Y...

متن کامل

مقایسه آزمایش پوستی کازونی با دو آنتی ژن : مایع کیست و آنتی ژن تهیه شده از اسکولکس کیست هیداتیک

متن کامل

تهیه و تخلیص آنتی بادی های پلی کلونال علیه آنتی ژن های مایکوباکتریوم آویوم پاراتوبرکلوزیس در خرگوش

زمینه و هدف: بیماری یون یک آنتریت گرانولوماتوزی مزمن در نشخوار کنندگان است و تهدید کننده سلامتی دام ها در سراسر دنیا است. در سال های اخیر محققین آنتی ژن های مایکوباکتریوم آویوم پاراتوبرکلوزیس را برای شناسایی یک تست تشخیصی حساس مورد توجه قرار داده اند؛ لذا شناسایی آنتی بادی ها علیه آنتی ژن های پیکره map ، جهت تشخیص یا تولید واکسن مؤثر می باشد. این مطالعه با هدف تهیه و تخلیص آنتی بادی ها علیه آنت...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی

کلمات کلیدی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023