ساخت و ارزیابی ایمنی زایی پلاسمید نوترکیب واجد ژن گلیکوپروتئین e2 ویروس اسهال ویروسی گاو و بخش c3d کمپلمان گاو

پایان نامه
چکیده

بیماری اسهال ویروسی گاو (bvd)، یکی از بیماری های مهم گاو است که با اسهال، سقط جنین، مرده‎زایی، بازگشت به فحلی و کاهش تولید شیر، خسارت های اقتصادی هنگفتی را سبب می شود. این بیماری توسط ویروس اسهال ویروسی گاو (bvdv) از خانواده فلاوی ویریده و جنس پستی ویروس ایجاد می شود. برنامه های مراقبتی مناسب مانند واکسیناسیون بر ضد ویروس bvd، اهمیت زیادی در پیشگیری و کنترل این بیماری دارند. پروتئین ساختمانی e2با وزن مولکولی kda 53، پروتئین ایمونوژن اصلی ویروس است و سبب القای آنتی بادی های محافظت کننده در حیوانات ایمن یا آلوده می گردد. به همین دلیل پروتئین e2 کاندید اصلی برای تولید واکسن های تحت واحد، واکسن dna و ویروس های نوترکیب می باشد. c3فراوانترین جزء کمپلمان پروتئینی کلیدی و فاکتور عمده ایمنی همورال در دفاع میزبان در سیستم کمپلمان می باشد. پژوهش های متعدد نشان داده اند که همراهی نسخه هایی از c3d ( آخرین جزء ناشی از شکست c3) در واکسن های dna به فعالیت پر توان ادجوانتی انجامیده است. هدف مطالعه حاضر ساخت و بررسی ایمنی زایی پلاسمید کد کننده e2 و جزء c3d کمپلمان گاو در موش بود. بدین منظور توالی کدکننده پروتئین e2 ویروس bvd سویه nadl با آزمایش rt-pcr تکثیر و درون وکتور بیانی یوکاریوتی pse-tag کلون شد. سپس سه نسخه از توالی ژن c3d به این پلاسمید افزوده گردید. 15 سر موش balb/c با سن 6-5 هفته به سه گروه 5 تایی تقسیم شده و به گروه اول [e2-(c3d)3]، µg 100پلاسمید حاوی ژن e2 به همراه سه نسخه از ژن c3d،‏‏ گروه دوم (e2)،µg 100 پلاسمید حاوی ژن e2 به تنهایی و گروه سوم (شاهد)، پلاسمید بدون ژن های فوق تزریق شد. موش ها در مجموع 3 بار با فاصله دو هفته ایمن شده و در روزهای صفر ، 14، 28 و 42 از موش ها خونگیری به عمل آمد. عیار سرمی آنتی بادی ضد e2 در گروه های مختلف با استفاده از روش الیزا ارزیابی گردید. نتایج آزمون الایزا تفاوت معنی داری را میان موش های گروه های اول و دوم با گروه سوم نشان داد اما دو گروه اول تفاوت معنی داری نداشتند. با اینحال این یافته ها حاکی از آن بود که پلاسمید های حاوی ژن e2 تهیه شده در این مطالعه دارای پتانسیل ایمنی زایی بوده و می توانند به عنوان یک dna واکسن در مطالعات میدانی مورد ارزیابی دقیقتری قرارگیرند.

منابع مشابه

بیان ژن کد کننده پروتئین E2 ویروس اسهال ویروسی گاو در E.coli

    اسهال ویروسی گاو (Bovine Viral Diarrhea) یکی از بیماری‌های ویروسی بسیار مهم این حیوان است که به وسیله‌ی یک پستی ویروس (BVDV) از خانواده‌ی فلاوی ویریده، ایجاد می‌شود.  BVDV با تأثیرگذاری بر روند تولید مثل نیز خسارت‌های بسیاری را موجب می‌شود.  پروتئین E2 مهم‌ترین پروتئین ساختمانی این ویروس در القای پاسخ ایمنی محافظت کننده است.  هدف از این پژوهش، کلونینگ و بیان ژن پروتئین E2 در باکتری E. c...

متن کامل

بیان ژن کد کننده پروتئین e2 ویروس اسهال ویروسی گاو در e.coli

اسهال ویروسی گاو (bovine viral diarrhea) یکی از بیماری­های ویروسی بسیار مهم این حیوان است که به وسیله­ی یک پستی ویروس (bvdv) از خانواده­ی فلاوی ویریده، ایجاد می­شود.  bvdv با تأثیرگذاری بر روند تولید مثل نیز خسارت­های بسیاری را موجب می­شود.  پروتئین e2 مهم­ترین پروتئین ساختمانی این ویروس در القای پاسخ ایمنی محافظت کننده است.  هدف از این پژوهش، کلونینگ و بیان ژن پروتئین e2 در باکتری e. coli بود....

متن کامل

تاثیر ویروس اسهال ویروسی گاو بر فنوتیپ مونوسیت گاوی

ویروس اسهال ویروسی گاو (bvdv) از لحاظ اقتصادی یک پاتوژن مهم صنعت پرورش دام در سراسر دنیا است. bvdv بسته به اثرات آن بر سلول های کشت شده به سیتوپاتیک (cp) و غیر سیتوپاتیک (ncp) دسته بندی می شود. bvdv شناخته شده است که پاسخ ایمنی میزبان را تغییر می دهد. از این، مولکول های کمپلکس سازگاری بافتی اصلی (mhc) کلاس ii نقش محوری در توسعه و عملکرد سیستم ایمنی بازی می کند، و در گاو شامل دو نوع dr و dq هستن...

متن کامل

طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N1

Background and purpose: The purpose of this study was to design a recombinant vector pEFGP- N1 containing the full length of HIV-1Vpr gene. To the best of our knowledge, the cloning of Vpr gene in pEGFP_N1 is not previously done. Materials and methods: As a source of Vpr gene the pUC19-Vpr recombinant vector was confirmed by digestion with restriction enzymes BglII and NotI in order to separ...

متن کامل

شیوع سرمی آلودگی به ویروس اسهال ویروسی گاو (BVDV) در گوسفندان استان خوزستان

    این مطالعه­ی سرولوژیکی به منظور تعیین فراوانی آلودگی گوسفندان استان خوزستان به ویروس اسهال ویروسی گاو (BVDV) صورت گرفت.  بدین منظور نمونه­ی خون از 318 رأس گوسفند متعلق به 5 شهر اهواز اخذ گردید.  گوسفندان به 2 گروه ماده و نر و 4 گروه سنی 1، 2، 3 و 4≤ سال تقسیم شدند.  از آزمون خنثی­سازی سرم و با استفاده از ویروس NADL، سویه­ی سیتوپاتیک و ژنوتیپ BVDV-1 برای جستجوی پادتن ضد ویروس BVDV استفاده شد...

متن کامل

بیان ژن کد کننده پروتئین e۲ ویروس اسهال ویروسی گاو در e.coli

اسهال ویروسی گاو (bovine viral diarrhea) یکی از بیماری های ویروسی بسیار مهم این حیوان است که به وسیله ی یک پستی ویروس (bvdv) از خانواده ی فلاوی ویریده، ایجاد می شود.  bvdv با تأثیرگذاری بر روند تولید مثل نیز خسارت های بسیاری را موجب می شود.  پروتئین e2 مهم ترین پروتئین ساختمانی این ویروس در القای پاسخ ایمنی محافظت کننده است.  هدف از این پژوهش، کلونینگ و بیان ژن پروتئین e2 در باکتری e. coli بود....

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023