بررسی اثر آنتاگونیست های گیرنده h2 هیستامین رسپتور بر آنزیم کاتالاز گلبول قرمز انسان و مطالعه پارامترهای کینتیکی آن

کاتالاز آنزیمی است که مسئول حذف هیدروژن پراکساید از سلول می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی تغییرات آنزیمی و سلولی کاتالاز اریتروسیت خون انسان در شرایط invitro می باشد. در این تحقیق خونگیری از انسان صورت گرفت و جهت جلوگیری از لخته شدن آن از edta استفاده شد. پس از سانتریفیوژ و جدا کردن پلاسما محلول نمک سدیم کلراید 0/01مولار جهت شکستن سلول و تهیه سوپ سلولی اضافه شد. سپس سانتریفیوژ مجدد صورت گرفت و تاثیرغلظت های متفاوت آنتاگونیست، ph و دماهای مختلف در حضور و غیاب آنتاگونیست با هم مقایسه شدند. همچنین فرآیند بررسی تغییرات ساختمانی آنزیم با استفاده از روش فلئورسانس و circular dichroism(cd) انجام شد و در نهایت بررسی جایگاه اتصال سایمتیدین به کاتالاز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج آزمایش نشان داد که بیشترین فعالیت آنزیم کاتالاز در هر دو گروه کنترل)بدون حضور دارو( و در حضور دارو،دمای 30 درجه سانتی گراد می باشد و بهترین ph برای هر دو گروه 9 ,11= ph مشخص شد. مطالعات کینتیکی آنزیم مشخص کرد که، در حضور دارو هر دو فاکتور km و vmax آنزیم تغییر می یابد به طوریکه دارو با مهار مخلوط آنزیم را مهار نمود. مقدار ki دارو برابر با 0/45و مقدار 50ic دارو برابر با 1/58 میکرو مولار محاسبه شد. رسم منحنی آرنیوس نشان داد که انرژی اکتیواسیون در حضور و عدم حضور دارو به ترتیب kj/mol 8/31 و kj/mol 4/7 میباشد. ضریب حرارتی )40-30(q 2/ درحضور و غیاب دارو بین دمای30 و 40 درجه در حدود 1/09 و 11/1معین شد. همچنین بر طبق مطالعات داکینگ صورت گرفته بهترین محل اتصال دارو به آنزیم مشخص گردید.