تکثیر سلول های بنیادی خونساز خون بند ناف با استفاده از سیستم cluster mir-17

به جهت اهمیت سلولهای بنیادی و مصارف بالینی آن در تولید مجدد بافت،سلول درمانی و بررسی اثرات دارویی،تا کنون مطالعات زیادی بر روی آنها انجام شده است.در این میان سلولهای بنیادی خونساز حائز اهمیت هستند.این سلولها از نظر بالینی جهت درمان بیماریهای خونی،لوسمی ها و بدخیمی های غیر هماتولوژیک استفاده می شوند.یکی از منابع جمع آوری hsc ،خون بند ناف می باشدکه نسبت به سایر منابع دارای مزایایی نظیر دسترسی سریعتر به منبع ،خطر کمتر بروز gvhd و انتقال عفونتهایی همچون cmv وebv و سرعت بالای تکثیر می باشد.اما به علت تعداد محدود hsc یک واحد اهدایی ucb در مقایسه با مغزاستخوان ،پیوند این سلولها دیرتر انجام می شود.یکی از راهکارهای مناسب برای غلبه بر این مسأله تکثیر exvivo سلولهاست. mir-17 از اعضای کلاستر 17-92 می باشد. طی مطالعات صورت گرفته ، بیش از 20 ژن هدف برای آن شناسایی شده است، که از آن جمله می توان به p21، tgf?1 ،bim و mapk9 اشاره کرد.mir-17 با سرکوب این ژنها منجر به افزایش تکثیر سلولها ، مهار آپوپتوز و افزایش بقا آنها می گردد.در این مطالعه، پارتیکل های ویروسی حامل ژن mir-17 با استفاده از وکتور plex-gfp-mir17 و وکتورهای کمکی آن در سلول hek293t تولید شدند.hsc-cd133+ با روش macs از خون بند ناف جدا شده و با این ویروسها ترنسداکت شدند. با استفاده از real time pcr افزایش بیان ژن mir-17 در سلولهای ترنسداکت شده ارزیابی شد و در انتهای 7 روزه ی کشت ، سلولها از نظر میزان بیان مارکر cd133 با کمک فلوسایتومتری بررسی شدند و روی بخشی از سلولها ،جهت ارزیابی توانایی کلنی زایی آنها ، تست سنجش کلنی انجام شد. بنا بر نتایج بدست آمده ، افزایش بیان ژن mir-17 در سلولهایcd133+ خون بند ناف ترنسداکت شده با وکتور لنتی ویروسی بطور موفق صورت می گیرد و این افزایش بیان منجر به افزایش تکثیر سلولهای cd133+ و حفظ بیشتر توانایی کلنی زایی آنها در مقایسه با سلولهای دستورزی نشده می گردد.