بررسی بیان ژن های اینترفرون گاما، فاکتور نکروزکننده تومور آلفا و فاکتور تحریک کننده رده گرانولوسیت-ماکروفاژ در غدد پستان گاوهای هلشتاین

تولید شیر یک صفت اقتصادی مهم گاو هلشتاین است. ورم پستان یکی از رایج ترین بیماری ها در گاوهای شیری بالغ است که اثر زیادی بر تولید و ترکیب شیر می گذارد. شیوع ورم پستان دلیل اصلی زیان های اقتصادی گاوداری های صنعتی دنیا می باشد. بیش از 25% از کل زیان های اقتصادی ناشی از کل بیماری ها می تواند مستقیما با ورم پستان در ارتباط باشد. بیماری ورم پستان از سایر بیماری های کاملا متمایز است، زیرا تعداد زیادی از میکروب-های مختلف می توانند ورم پستان را ایجاد کنند. در سال های اخیر نقش بیان ژن های سیتوکین ها در رابطه با ورم پستان، موضوع بسیاری از مطالعات بوده است. سیتوکین ها واسطه های تنظیم-کننده ایمنی هستند که نقش اصلی را در تنظیم پاسخ های ایمنی علیه عفونت های مختلف ایفا می کنند. مطالعات مختلف نشان داده اند که تغییرات در بیان سیتوکین ها با فعالیت بیماری در اختلالات ایمنی یا التهابی ارتباط دارد. تحقیقات نشان می دهد که استفاده از سیتوکین های نوترکیب گاوی نظیراینترلوکین-2 ، اینترفرون گاما (? –ifn)، فاکتور تحریک کننده رده گرانولوسیت-ماکروفاژ (gm-csf) و فاکتور نکروزکننده تومور آلفا (tnf-?) در غدد پستانی گاو های سالم به تحریکات ایمنی ذاتی و اکتسابی کمک می کند. در این مطالعه نیز با استفاده از تکنیکreal time pcr نقش سیتوکین های التهابی مانند اینترفرون گاما (?–(ifn، فاکتور نکروزکننده تومور آلفا (tnf-?) و فاکتور تحریک کننده رده گرانولوسیت-ماکروفاژ (gm-csf) در غدد پستانی گاوهای هلشتاین سالم در ایران در سه مرحله تازه زا، اواسط شیردهی و اواخر شیردهی و دام های ورم پستانی در دام های شکم اول بررسی شد. بدین منظور استخراج rna از شیر 18 دام سالم (6 دام برای هر مرحله) و 6 دام ورم پستانی صورت گرفت. برای بررسی بیان ژن های مورد مطالعه، ابتدا بهترین ژن مرجع در شرایط این آزمایش با استفاده از نرم افزارهای normfinder, v20 و bestkeeper, 2004، مورد بررسی قرار گرفت و مشخص شد که ژن بتا-اکتین پایدارترین و مناسب ترین ژن مرجع می باشد. در نتیجه بیان سیتوکین های مذکور با این ژن مورد مقایسه قرار گرفت. برای آنالیزهای بیان ژن نیز از برنامه rest, 2009, v2.0.13 استفاده شد. بر این اساس مشخص شد ژن?–ifn در هیچ از مراحل شیردهی در دام های سالم تفاوت بیان معنی داری نداشت. ولی ژن tnf-? در مرحله اواخر شیردهی بیان بیشتری نسبت به اواسط و در اواسط شیردهی بیان کمتری نسبت به اوایل شیردهی داشت. ژن gm-csf نیز تنها در دوره اواسط شیردهی بیان بالاتری نسبت به تازه زا داشت. نتایج این مطالعه همچنین نشان داد که ورم پستان ناشی از باکتری اشرشیا کلای باعث افزایش بسیار بالای بیان ژن های ?–ifn، tnf-? و gm-csf در مراحل مختلف شیردهی شد. هیچ همبستگی معنی داری نیز بین ژن های tnf-? و ?–ifn و gm-csf در هیچ یک از مراحل شیردهی وجود نداشت. در دوره های تازه زا و اواخر شیردهی بیان هر سه ژن tnf-?، ?–ifn و gm-csf بین دام های مختلف متفاوت بود، این درحالی بود که در دوره اواسط شیردهی تنها برای ژن ?–ifn بین دام ها تفاوت بیان متفاوتی وجود داشت و در بیماری ورم پستان ناشی از باکتری اشرشیا کلای نیز هیچ تفاوت معنی داری برای هر سه ژن بین دام های مختلف وجود نداشت.