بررسی اثر روی در محلول انجماد شیشه ای بر رشد آزمایشگاهی فولیکولهای بدست آمده از تخمدان منجمد شیشه ای -ذوب موش

حفاظت بافت تخمدان با سرما یک گزینه مهم در حفظ باروری افراد مبتلا به سرطان و تحت مداوا با شیمی درمانی و رادیوتراپی است. به دست آوردن یک متد قابل اطمینان جهت حفاظت تخمدان پستانداران به وسیله سرما یک پیشرفت قابل توجه در زمینه بیولوژی تولید مثل درحفظ منبع ژنتیکی است.فولیکول منجمد شده همانند فولیکول های منجمد نشده دارای پتانسیل رشد در شرایط آزمایشگاهی است با این حال نرخ تکوین آن نسبت به بافت تخمدان تازه کمتر است.محققان از تکنیک های متنوع و ضدیخ های متفاوت برای بهبود روش انجماد تخمدان استفاده کرده اند علی رغم پیشرفت های اخیر هنوز قابلیت تخمدانهای منجمد شده پایین است. مطالعه حاضر برای یافتن اینکه آیا غلظت های مختلف روی در محلول انجماد شیشه ای میتواند رشد و بقای فولیکول های مشتق از تخمدان منجمد شیشه-ای را بهبود دهد طراحی شده است. در این تحقیق تخمدان های موش های سوری با رده سنی4-2 هفته به طور تصادفی در گروه های زیر مورد استفاده قرار گرفتند: گروه-های منجمد شیشه ای-ذوب v3,v2,v1, v0 باافزودن غلظت های 200,150,100,0 میکروگرم بر دسی لیتر روی. تخمدان ها در گروه های منجمد شیشه ای به طور متوالی در محلول-های انجماد شیشه ای )vs1 dmso وeg 5/7 درصد در محلول پایه ?-mem + 20% fbs به مدت 7دقیقه) و vs2 (dmso وeg 15 درصد در محلول پایه ?-mem + 20% fbs به مدت 3دقیقه) غوطه ور شدند و در نی انجمادی قرار گرفته و به مدت یک هفته در تانک نیتروژن مایع نگهداری شدند. پس از یک هفته تخمدان ها در دمای 37 درجه سانتی گراد به ترتیب در غلظت های 1,5/0,25/0 مولار سوکروز ذوب شدندو همانند تخمدانهای منجمد نشده مرحل بافت شناسی را طی کردند و در نهایت با برش های سریالی برش زده شدند. هیچ تفاوت چشمگیری از نظر کیفی در فولیکول های کوچک گروه های آزمایش مشاهده نشد. در مقابل تعداد فولیکول های بزرگ و در حال رشد تخریب شده در اثر انجماد نسبت به گروه منجمد نشده کمی بیشتر بود.بنابراین انجماد شیشه ای با استفاده از egو dmso یک پروسه موثر در حفظ تخمدان است. فولیکول های پره آنترال با قطر 130-100میکرومتر به روش مکانیکی از تخمدان های منجمد شده و منجمد نشده جدا و به مدت 9 روز کشت داده شدند. همچنین تخمک های گرفته شده از تخمک ها در محیط بلوغ قرار گرفتند. فولیکول ها در پنج گروه آزمایش برای تعیین بقا با رنگ آمیزی تریپان یلو, رشد آزمایشگاهی و بقا پس از کشت مورد بررسی قرار گرفتند. همچنین بقا و بلوغ تخمک مورد بررسی قرار گرفت. میزان بقای قبل و بعد از کشت و رشد فولیکول ها در گروه انجماد شیشه ای با افزایش غلظت 200میکروگرم بر دسی لیتر روی نسبت یه سایر گروه های انجمادی بیشتر و دارای اختلاف معنی دار بود با این حال این میزان نسبت به گروه منجمد نشده کمتر بود(anova, p-value<0.05). علاوه براین اختلاف معنی داری در گروه های انجمادی با افزودن روی از نظر درصد بقا و بلوغ مشاهده نشد اما تمامی گروه ها در مقایسه با گروه منجمد شیشه ای بدون افزودن روی نتایج بهتری را نشان دادند. یافته های ما در این تحقبق نشان داد که غلظت های افزاینده روی در محلول انجماد شیشه ای باعث بهبود بقا و رشد فولیکول-ها و همچنین بقا و بلوغ تخمک ها دارد.