بررسی اثر یوژنول بر میزان متیلاسیون پروموتر ژن تلومراز ترانس کریپتاز معکوس انسان (htert) و بیان ژن آن در سلول های بنیادی جداشده از بافت چربی

مقدمه: یوژنول به عنوان ماده موثره میخک یک عامل آنتی اکسیدان و ضدالتهاب با خواص درمانی قوی شناخته شده است. هدف: در مطالعه حاضر به بررسی اثر یوژنول بر میزان متیلاسیون پروموتر ژن تلومراز ترانس کریپتاز معکوس انسان (htert) و بیان ژن آن در سلول های adscsپرداخته شد. مواد و روش¬ها: سلول های adscs موردنظر از بافت چربی انسان جدا گردید و تحت شرایط مناسب محیط کشت به سلول¬های چربی و استخوان تمایز داده شدند. سپس برای بررسی خصوصیات ایمنوفنوتایپینگ این سلول ها، بیان یکسری از نشانگرهای سطح سلولی آن ها با روش ایمنوسیتوشیمی مورد ارزیابی قرار گرفت. در ادامه سلول های کشت داده شده با غلظت¬های متفاوت یوژنول (µg/ml1، 5، 10، 20، 100، و200 ) و در بازه¬های زمانی 24، 48، و 72 ساعت تحت تیمار قرار گرفتند، و متعاقب آن الگوی رشد و تکثیر آن ها با روش رنگ آمیزی تریپان¬بلو و آزمون mtt بررسی شد. در این مطالعه متیلاسیون پروموتر ژن htert با روش توالی یابی مستقیم و بیان ژن آن با روش real-time pcr انجام شد. نتایج: درصد رشد و تکثیر سلول های adscs تحت تیمار با یوژنول (µg/ml10) افزایش معناداری را در مقایسه با گروه کنترل نشان داد(p<0.05) و میزان متیلاسیون پروموتر ژن htert در نمونه¬های تحت تیمار با یوژنول نسبت به گروه کنترل تغییر کرد، درحالی که بیان ژن htert در سلول¬های adscs (قبل و بعد از تیمار با یوژنول µg/ml10) مشاهده نشد. بنابراین در این تحقیق اثر قابل مشاهده ای بین افزایش رشد و تکثیر سلول های adscs تحت تیمار با یوژنول ( µg/ml10) و افزایش بیان ژن htert مشاهده نشد لذا این امر حاکی از آن است که مکانیسم¬های دیگری می¬توانند در این فرایند دخیل باشند.