بررسی برهمکنش تعدادی از کمپلکس های فلزی کورکومین با آنزیم لیزوزیم سفیده تخم مرغ و اثر آن ها بر فعالیت کاتالیتیکی آنزیم

در این تحقیق برهم‏کنش سه ترکیب فلزی کورکومین به نام¬های گالیم¬کورکومین، وانادیل¬کورکومین و ایندیم¬کورکومین با پروتئین مدل لیزوزیم سفیده‏ی تخم مرغ مورد مطالعه قرار گرفته است. لیزوزیم نقش¬های دارویی و فیزیولوژیکی بسیاری در بدن ایفا می¬کند بنابراین به عنوان یک پروتئین مدل می¬تواند استفاده شود. کورکومین هم اصلی¬ترین ماده موجود در زردچوبه است که موجب رنگ زرد این ترکیب می¬شود. در این تحقیق برهم‏کنش لیگاندهای یاد شده با پروتئین لیزوزیم سفیده‏ی تخم‏مرغ با استفاده از فلورسانس حالت پایا، فلورسانس سینکرونس، طیف‏سنجی دورنگ‏نمایی دورانی، آشکارسازی فیبریل‏های آمیلوئید، انتقال انرژی از پروتئین به لیگاند، جذب¬سنجی و طیف‏سنجی مرئی-فرابنفش انجام شد. نتایج آزمایش‏های تیتراسیون فلورسانس نشان داد که بر‏هم‏کنش هر یک از سه لیگاند مذکور با لیزوزیم با تشکیل کمپلکس غیر فلورسنت بین لیگاند و پروتئین با استوکیومتری 1:1 همراه است. مقادیر ثابت استرن-ولمر (ksv)، ثابت خاموشی دومولکولی (kq) و ثابت پیوندی (ka) از آنالیز داده‏های فلورسانس به دست آمد. بررسی انتقال انرژی از لیزوزیم به هر یک از لیگاندهای مذکور نشان داد که این سه لیگاند در نزدیکی تریپتوفان‏ 62 در جایگاه پیوندی به فواصل 5/2 تا 5/4 نانومتر قرار گرفته‏اند. در بررسی طیف‏های سینکرونس مشاهده شد که لیگاندهای موردنظر در فرایند برهم‏کنش با لیزوزیم قطبیت محیط اطراف دنباله¬های تیروزین و تریپتوفان را تغییر نمی‏دهند. در بررسی نتایج آمیلوئیدی مشخص شد که افزایش غلظت هر سه لیگاند باعث کاهش تجمع آمیلوئیدی لیزوزیم شده است. بر اساس نتایج محاسبات دمایی کمپلکس نهایی بین این سه لیگاند و پروتئین لیزوزیم با استفاده از برهم¬کنش¬های هیدروژنی پایدار می¬شود منفی¬تر بودن تغییرات آنتالپی اتصال وانادیل¬کورکومین-لیزوزیم و ایندیم¬کورکومین-لیزوزیم نسبت به آنتالپی اتصال گالیم¬کورکومین-لیزوزیم نشان¬دهنده قوی¬تر بودن پیوند وانادیل¬کورکومین-لیزوزیم و ایندیم¬کورکومین-لیزوزیم است که در هماهنگی کامل با ثابت ظاهری پیوندی است.