تمایز سلولهای مشابه جرم در طی هم کشتی سلولهای بنیادی مزانشیمی استخراج شده از ژله وارتون بند ناف بر روی لایه تغدیه کننده سرتولی و تحت القای دوزهای مختلف رتینوئیک اسید و bmp4 درآزمایشگاه

با افزایش میزان بقا به دنبال درمان سرطان، باروری مردان محدود شده است چرا که درمان های ضد سرطان به میزان زیادی سلول های جرم را از بین می برد. از این رو یافتن راهی برای تمایز این سلول ها از منابع سلولی دیگر و نگهداری آن ها در محیط کشت و تکثیر آن ها می تواند زمینه ای برای ظهور اسپرماتوزنز در شرایط in vitroفراهم کند که به عنوان یک استراتژی برای درمان ناباروری حایز اهمیت است. بر پایه مطالعات گذشته سلول های سوماتیکی سرتولی در تمایز سلول های جرم تأثیر به سزایی دارند. این سلول ها باعث تغذیه و حفاظت بیشتر سلول های جرم شده و فاکتور های رشدی لازم جهت تمایز این سلول ها را فراهم می کند. به منظور تشخیص سلول های جرم در محیط کشت از شاخص هایی که درgerm-like cell ها به طور اختصاصی بیان می گردد استفاده می شود. در مطالعه حاضر ابتدا سلول های بنیادی مزانشیمی (msc) از بافت ژله وارتون بند ناف مذکر جدا سازی شده و سپس به روش تکه بافتی کشت می شوند. سلول های حاصل به محیط کشت dmemبا گلوکز بالا و ده درصد سرم گوساله منتقل شده و به مدت 11-7 روز به حال خود رها می شوند. هر دو روز یک بار محیط کشت آن ها تعویض می شود. پس از مشاهده80-70 درصد فشردگی سلولی در محیط پاساز سلولی انجام می گیرد. برای اطمینان از خاصیت چند توانی سلول های mscبیان مارکرهای cd105وcd44 وcd34 ، مورد بررسی قرار گرفت. سلول های mscپس از پاساژ چهارم بر روی بستر سلول های سرتولی به عنوان لایه تغذیه کننده و تولید کننده فاکتور های تمایزی و نیز دوزهای مختلف bmp4 ) 5 و 5/0 نانوگرم ) و رتینوئیک اسید (m5-10وm 6-10 قرار می گیرند. تمایز سلول های mscبه سلول های مشابه جرم با بررسی بیان ترانسکریپت های prm1،stra8،oct4 ، plzf از طریق rt-pcr در طی روز های مختلف کشتی اثبات خواهد شد .نتایج نشان داد دوزm 6-10 رتینوئیک اسید بیشترین خاصیت القایی را در تولید سلول های مشابه جرم از سلول های بنیادی مزانشیمال بند ناف دارد. به طوری که در این شرایط سلول هایی مشابه اسپرماتوگونی تولید شدند. با توجه به بیان مثبت prm1 اثبات شد که این سلول ها از مرز تقسیمات میوزی که خاص سلول های جرم می باشد گذشتند و سلول های هاپلوئیدی تولید نمودند. در صورت موفقیت در تولید این سلول ها بافت ژله وارتون بند ناف به عنوان منبعی جهت تولید سلول زایا برای افراد مذکر نابارور معرفی می شود که می تواند جهت تولید اسپرم مورد استفاده قرار گیرد