تشخیص هلیکوباکتر پیلوری در مدفوع بر اساس آنتی بادیهای ضد پروتئین نوترکیب caga

پایان نامه
چکیده

1 -1 –چکیده: زمینه و هدف:هلیکوباکتر پیلوری یک باسیل گرم منفی که هم اکنون به عنوان عامل اتیولوژیک گاستریت مزمن ولنفوم معده شناخته شده است.احتمالاً این باکتری معمول ترین عفونت مزمن باکتریال در انسان بوده که تقریباً نیمی از جمعیت جهان را آلوده نموده است.ژن caga یکی از پروتئین های سطحی غشاء خارجی هلیکوباکتر پیلوری است که از قدرت ایمنی زایی بالایی بر خوردار است که پس از ورود به سلولهای اپی تلیال معده،منجر به دوکی شدن سلول میزبان وتخریب آن می شود همچنین وجود این ژن در باکتری باعث مستعد شدن آن برای کلونیزاسیون بیشترو توانایی بیشتر این ارگانیسم جهت پاسخ ایمنی شدیدتر در سلولهای اپی تلیال معده می گردد.هدف از انجام این طرح تحقیقاتی با تولید ناحیه انتی ژنیک پروتئین caga و تزریق این پروتئین به حیوان آزمایشگاهی آنتی بادی ضد آن تولید گردد.سپس با انجام آزمایش وسترن بلات وجود پروتئین ترشح شده از باکتری در مدفوع مبتلایان به هلیکوباکتر پیلوری بررسی شد واز این پروتئین می توان برای تهیه و طراحی کیت های تشخیصی و حتی طراحی واکسیناسیون استفاده کرد. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، قطعه حاوی ناحیه دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک ژنcaga به طول1245 جفت بازکه در تحقیقات قبلی در گروه میکروب شناسی بدست آمد. ناحیه ژنوم مربوط به نواحی آنتی ژنیک caga وارد سلول escherichia coli گردید. پس از خالص سازی پروتئین نوترکیب، آنتی ژنیسیته آن به روش وسترن بلات با سرم رت های تلقیح شده با پروتئین نوترکیب خالص شده بررسی شد ،سپس با انجام آزمایش وسترن بلات وجود پروتئین ترشح شده از باکتری در مدفوع مبتلایان به هلیکوباکتر پیلوری بررسی شد. یافته ها: نتایج pcr و تعیین توالی نشان داد که ژن هدف به درستی در ناقل مورد نظر کلون شده است. بیان پروتئین با استفاده از iptg القا شد. پروتئین بیان شده به وسیله کیت ni-nta تخلیص گردید و با آنتی بادی های استفاده شده در وسترن بلات واکنش داد. آنتی بادی ضد پروتئین نوترکیب caga قادر به شناسایی شکل طبیعی این پروتئین درمدفوع تقریباً 70 %از بیمارانی که تست آنتی ژن مدفوعی شان مثبت شده است بود. نتیجه گیری: پروتئین نوترکیب caga دارای خاصیت آنتی ژنیک و ایمنوژنیک می باشد.با استفاده از تولید نواحی آنتی ژنیک پروتئین ،تولید آنتی بادی ضد آن ،پروتئین طبیعی caga را در مدفوع مبتلایان شناسایی کرد. بنابراین می توان از آن به عنوان کاندید مناسبی برای طراحی کیت های تشخیصی و واکسن هلیکوباکتر پیلوری استفاده نمود. واژگان کلیدی: هلیکوباکتر پیلوری، نواحی آنتی ژنیک، پروتئین نوترکیب، پروتئین caga، تست آنتی ژن مدفوع.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تولید پروتئین نوترکیب caga هلیکوباکتر پیلوری

زمینه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری باسیلی گرم منفی است که موجب بیماری های معده و دئودنوم در انسان میشود. از مهمترین ژنهای مرتبط با بیماری زایی این باکتری ژن caga میباشد که موجب کلونیزاسیون بیشتر آن در سلولهای اپی تلیال معده و ایجاد التهاب و زخم های گوارشی میگردد. در این تحقیق سعی گردید تا تولید پروتئین نوترکیب حاوی ناحیه دارای بالاترین خاصیت آنتی ژنیک caga در باکتری e. coli انجام گیرد. مواد و روش ه...

متن کامل

اثر سینرژیسمی پروتئین نوترکیب CagA و LPS سروتیپ O2 هلیکوباکتر پیلوری در بروز پاسخ ایمنی مناسب علیه این باکتری

سابقه و هدف: هلیکوباکتر پیلوری یکی از عوامل عفونی باکتریایی معده بوده که در سراسر جهان گزارش شده است. با توجه به اهمیت لیپوپلی ساکارید و cagA، این مطالعه در صدد بررسی اثر سینرژیسمی ایمنی زایی این دو فاکتور به منزله انتخاب کاندید ایمونیزاسیون مناسب علیه این باکتری میباشد. مواد و روشها: در این مطالعه تجربی لیپوپلی ساکارید سروتیپ O2 هلیکوباکتر پیلوری به روش فنل داغ تخلیص و پروتئین نوترکیب CagA در ...

متن کامل

بررسی فراوانی آلل های ژن vacA و cagA هلیکوباکتر پیلوری در مدفوع اطفال سرم مثبت شهرستان کرمانشاه

زمینه و اهداف: هلیکوباکتر پیلوری مهم ترین عامل التهاب معده و سوء هاضمه در انسان. با توجه به اهمیت این باکتری و شیوع متفاوت آن در مناطق مختلف کشور، هدف از این پژوهش، بررسی فراوانی آلل های ژن vacA و cagA هلیکوباکترپیلوری در مدفوع اطفال سرم مثبت شهرستان کرمانشاه به عنوان یک منطقه پرخطر می باشد. مواد و روش کار: این تحقیق بر روی 300 کودک 2 تا 9 ساله شهرستان کرمانشاه صورت گرفت. نمونه‌ها ابتدا به روش ...

متن کامل

آماده‌سازی نانوذرات تری‌متیل کیتوزان حامل پروتئین فعال کننده نوتروفیلی نوترکیب از هلیکوباکتر پیلوری

Background and purpose: Breast cancer is one of the leading causes of death in women around the world with a very high degree of mortality and morbidity. Conventional treatments use cytotoxic drugs which have high levels of side effects, affecting the patient’s quality of life. Therefore today’s pharmacology is looking into treatments with low side effects and maximum efficiency. The helicobact...

متن کامل

بیان، تخلیص و آنتی ژنیسیته فیوژن پروتئین نوترکیب ureb229-561-hpaa هلیکوباکتر پیلوری

هلیکوباکتر پیلوری یک باکتری مارپیچی، میکروآئروفیل و گرم منفی است که مخاط معده و دئودنوم انسان ها را کلونیزه می کند. در این محل ها باکتری موجب بروز گاستریت مزمن و اولسر پپتیک می گردد. عفونت هلیکوباکتر پیلوری همچنین با ایجاد لنفوم بافت لنفاوی مرتبط با مخاط و سرطان معده ارتباط دارد. رژیم های درمانی آنتی بیوتیکی رایج به همراه یک مهار کننده پمپ پروتون مشکلاتی را چون هزینه بالا، عدم همکاری و پذیرش بی...

15 صفحه اول

مقایسه پاسخ به درمان ضد هلیکوباکتر پیلوری در دو گروه بیماران واجد cagA Ab و فاقد آن

چکیده زمینه و هدف: CagA در 60 تا 80% هلیکوباکترپیلوری‌ها دیده می‌شود. سوش‌هایی که دارای CagA می‌باشند، به نظر می‌رسد دارای ویرولانس بیشتری هستند. هدف از انجام این پژوهش مقایسه میزان ریشه‌کنی با رژیم چهار دارویی در ژنوتیپ‌های cagA+ و cagA- بوده است. روش بررسی: بیمارانی که به دلیل سوء هاضمه (Dyspepsia) در بخش آندوسکوپی بیمارستان حضرت رسول (ص) تحت آندوسکوپی قرار گرفته بودند و نتیجه آزمون هلیکوب...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشکی - دانشگاه علوم پزشکی و خدمات بهداشتی درمانی استان مرکزی - دانشکده پزشکی اراک

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023