بررسی اثر ضدسرطانی عصاره اتانلی جلبک سبز دونالیلا سالینا با استفاده از برخی روش های chemofx assay

چکیده مقدمه: سرطان پستان(breast cancer)، شایعترین بدخیمی در زنان و علت اصلی مرگ ناشی از سرطان در زنان میانسال می باشد. بدلیل افزایش شیوع این بیماری، تلاش در جهت دستیابی به داروهایی با منشا گیاهی با عوارض جانبی کمتر، ضروری می باشد. جلبک ها بواسطه تولید ترکیبات ارزشمند دارویی، توجه محققین رابخود معطوف داشته ا ند. ریز جلبک دونالیلا سالینا (donaliella salina) بدلیل تولید ترکیباتی با خواص آنتی اکسیدان، حائز اهمیت می باشد. هدف از این تحقیق، بررسی اثرات ضدسرطانی عصاره اتانلی دونالیلا سالیناو تاثیر آن برمیزان سایتوتوکسیتی داروی شیمی درمانی تاکسول، بر رده سلولی 4t1استخراج شده از تومور پستانی موش ویستار(balb/c) بود. مواد و روش ها: جلبک دونالیلا سالینا از مرکز بیوتکنولوژی قشم تهیه و در محیط کشت جانسون کشت داده شد. توده جلبکی پس از برداشت و شستشو با بافرنمکی فسفات (phosphate buffered salin )، در برودت خشک گردید و جهت تهیه عصاره اتانلی، استفاده شد. سلولهای سرطانی 4t1 از انستیتو پاستور تهیه و در محیط کشت rpmi(royal park memorial institute) واجد10درصد سرم جنین گاوی کشت داده شد. سلولها در معرض غلظت های g/ml?100-50-25- 5/12- 25/6-0 عصاره جلبکی و غلظت هایnm/l20،10 ، 5 ، 5/2، 25/1 ،0 تاکسول و ترکیب 1:1از دو ماده، در فواصل زمانی 48-24- 6 ساعت انکوبه شدند. جهت ارزیابی اثرات سایتوتوکسیتی عصاره جلبکی و تاثیر آن برمیزان کشندگی تاکسول، از تست mttاستفاده شد. از رنگ های فلورسنت هوخست و پروپدیوم آیوداید، جهت مشاهده تغییرات مورفولوژی سلولهای تحت تیمار با عصاره و تاکسول، استفاده گردید. آنالیزعصاره جلبکی جهت شناسایی و تعیین مقدار بتاکاروتن، توسط hplc (high performance liquid chromatography) انجام شد. نتایج:آنالیزhplc وجود بتاکاروتن را درعصاره جلبکی تائید کرد. نتایج نشان داد که عصاره جلبکی بطور وابسته به دوز و زمان، دارای اثرات کشندگی بررده سلولی4t1بود و میزان کشندگی تاکسول در ترکیب با عصاره جلبکی، افزایش یافت. ld50(lethal dose) عصاره، مربوط به تیمار 48 ساعته و معادل43/36 g/ml? وld50 تاکسول نیز مربوط به تیمار 48 ساعته وnm/l427/6 محاسبه شد.در ترکیب عصاره-تاکسول،ld50 تاکسول به482/3نانومولاردر لیتر، در تیمار24 ساعته کاهش یافت که نشان دهنده افزایش کشندگی آن در ترکیب با عصاره جلبکی می باشد. نتیجه گیری:عصاره اتانلی ریز جلبک دونالیلا سالینا دارای اثر کشندگی بر سلولهای رده 4t1 بوده و با افزایش غلظت و زمان در معرض گذاری، اثر کشندگی آن نیز افزایش یافت و در ترکیب با تاکسول، میزان کشندگی آنرا افزایش داد. بنابراین ریزجلبک دونالیلا سالینا با دارا بودن ترکیبات آنتی اکسیدان و ضد توموری، بعنوان داروی ضد سرطان با منبع گیاهی می تواند مورد بررسی بیشتر قرار گیرد. واژه های کلیدی:دونالیلا سالینا، تاکسول،بتا کاروتن،سرطان پستان