میزان زنده مانی و تغییرات فراساختاری سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند نژاد قزل پس از انجماد در محیط انجمادی حاوی غلظت های مختلف fbs
پایان نامه
- وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده دامپزشکی
- نویسنده شیما طریقی
- استاد راهنما بابک قاسمی پناهی جواد اشرفی هلان غلامعلی مقدم سجاد جعفرزاده
- تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
- سال انتشار 1392
چکیده
در مطالعه حاضر، سلول های بیضه با استفاده از دو مرحله هضم آنزیمی از بیضه 4 راس بره حدود 2 ماهه نژاد قزل استخراج شد. نمونه گیری از بیضه به روش tese صورت گرفت. پس از تائید شدن ماهیت سلول های بنیادی اسپرماتوگونی و سلول های سرتولی موجود در سوسپانسیون سلولی حاصل با انجام آزمایش ایمونوسیتوشیمی گیرنده های oct-4 و plzf و ویمنتین، این سلول ها به مدت 12 روز در شرایط آزمایشگاه کشت داده شده و در قالب سه گروه انجمادی برای مدت 1 ماه در محیط انجمادی حاوی ماده محافظ کننده در برابر سرمای dmso و fbs به روش انجماد آهسته در دمای -۱۹۶ درجه سانتی گراد و در نیتروژن مایع منجمد گردید. گروه های انجمادی 1 و 2 و 3 به ترتیب دارای ۵۰، 70 و 90 درصد fbs بودند. میزان dmso موجود در تمامی گروه ها 10 درصد در نظر گرفته شده بود. سلول ها پس از گذشت 1 ماه با روش ذوب سریع و در حمام آب حدود 37 درجه سانتی گراد از انجماد خارج شد. پس از ذوب سلول ها درصد زنده مانی سلول ها به وسیله رنگ آمیزی تریبان بلو مورد ارزیابی قرار گرفته و سپس سلول ها تثبیت شده و از نظر میزان آسیب وارده بر سلول ها در اثر انجماد، توسط میکروسکوپ الکترونی انتقالی مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج حاصله نشان دهنده کاهش میزان زنده مانی سلول ها پس از انجماد بود. همچنین در این مطالعه مشاهده شد که افزایش میزان زنده مانی سلول ها پس از انجماد دارای ارتباط مستقیمی با افزایش میزان fbs موجود در محیط انجمادی می باشد (به ترتیب 12/64 %، 03/67 % و 41/72 % برای قبل از انجماد وگروه های 1، 2 و 3). این در حالی است که در مطالعه مقاطع نیمه نازک رنگ آمیزی شده با تولوئیدن بلو و گرید های الکترونی تهیه شده با افزودن fbs به میزان ۷۰٪ در محیط انجمادی٬ کاهش قابل ملاحظه ای از تغییرات آسیب شناختی مشاهده گردید. لازم به یادآوری است که با افزودن fbs به میزان ۹۰٪ تغییرات آسیب شناختی شدیدتر از گروه دوم(۷۰٪ fbs) ولی کمتر از گروه اول (۵۰٪ fbs) قابل مشاهده بود.
منابع مشابه
اثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده مانی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد
سابقه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیستفناوری دارند. جهت نگهداری طولانیمدت این سلول ها از تکنیک انجماد استفاده می شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت های مختلف fbs و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود. مواد و روش ها: سلول های بیضه بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالصسازی گردید. سپس، سلو...
متن کاملاثرات غلظت های مختلف ساکاروز و سرم جنین گوساله بر زنده مانی سلول‌های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد
سابقه و هدف: سلول های بنیادی اسپرماتوگونی کاربردهای فراوانی در طب تولید مثلی و زیستفناوری دارند. جهت نگهداری طولانیمدت این سلول ها از تکنیک انجماد استفاده می شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت های مختلف FBS و ساکاروز روی درصد حیات اسپرماتوگونی بره بود. مواد و روش ها: سلول های بیضه بره های نابالغ با روش هضم آنزیمی دو مرحله ای استخراج شده و با حذف تمایزی خالصسازی گردید. سپس، سلو...
متن کاملاثرات غلظت های مختلف ساکارز و سرم جنین گوساله بر زنده مانی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی بره قبل و بعد از انجماد
سلول های بنیادی اسپرماتوگونی دارای قدرت خودنوزایی و انتقال ژن به نسل بعدی هستند. جهت نگهداری و ذخیره سازی طولانی مدت این سلول ها از تکنیک انجماد استفاده می شود. هدف از مطالعه حاضر، بررسی تاثیر غلظت های مختلف fbs (10 و 20 درصد) و سطوح مختلف سوکروز (07/0، 14/0 و 21/0 مول) روی درصد حیات sscs بره قبل از انجماد و متعاقب یخ گشایی بود. بیضه ی بره های با سنین کمتر از 3 ماه از کشتارگاه تهیه و متعاقب جدا...
مطالعه تغییرات فراساختاری سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفندان قزل در حضور غلظت های مختلف فاکتور رشد شبه انسولینی-1 (igf-i)
سلول های بنیادی اسپرماتوگونی تنها سلول های بنیادی بدن هستند که دارای قدرت خودنوسازی و همچنین توانایی انتقال ژن به نسل های بعدی می باشند. امروزه جداسازی، کِشت و پیوند این سلول ها در دامپزشکی به منظور تولید حیوانات ترانس ژنیک، اصلاح نژاد دام و درمان ناباروری در حیوانات با ارزش مورد توجه قرار گرفته است اما همواره به دلیل ناکافی بودن تعداد و میزان پایین زنده مانی این سلول ها در محیط کشت، محدودیت های...
15 صفحه اولاثرسلنیوم بر میزان حرکت، مورفولوژی و زنده مانی اسپرم پس ازپدیده انجماد و ذوب
زمینه: وجود سلنیوم برای عملکرد طبیعی و انجام فرایند اسپرماتوژنز ضروری است . این ماده به عنوان عامل کمککننده آنتی اکسیدانی به کاهش رادیکالهای آزاد اکسیژن منجر میشود و انتظار میرود در افزایش باروری مؤثر باشد . هدف : مطالعه به منظور تعیین اثر سلنیوم بر حرکت، مورفولوژی و زندهمانی اسپرم بعد از فرایند انجماد و ذوب انجام شد. مواد و روشها: این مطالعه تجربی بر 42 نمونه مایع سمن با شاخصهای ط...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده{@ msg_add @}
نوع سند: پایان نامه
وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده دامپزشکی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023