همسانه سازی توالی کدکننده پروتئین گزارشگر ترشحی mgfp5-er

یک سلول یوکاریوتی حاوی هزاران نوع پروتئین مختلف است. هر کدام از این پروتئین ها برای انجام وظایف خود باید به مکان عمل مناسب هدف دهی شود. پروتئین ها معمولا در سیتوپلاسم ساخته می شوند و سپس بر حسب نوع سیگنال پپتید به اندامکهای مختلف فرستاده می شوند. امروزه تراریخته سازی و تولید پروتئین های هترولوگ، یکی از موضوعات مهم در مهندسی ژنتیک گیاهی است. ژن گزارشگر، یک ژن محک است که بیان آن منجر به فنوتیپ قابل سنجش می شود. از سیستم گزارشگر، برای بررسی و تحلیل بیان ژن در گیاه و همچنین بهینه سازی پارامترهای انتقال موفقیت آمیز ژن، استفاده می شود. ژن های گزارشگر زیادی برای ارزیابی محصولات تراریخته وجود دارند که یکی از پرکاربردترین گزارشگرهای سیستم گیاهی، gfp یا پروتئین فلورسنت سبز است. gfp یک پروتئین کوچک 27 کیلو دالتونی با 238 اسیدآمینه است که هنگامی که به وسیله نور فرابنفش یا آبی برانگیخته می شود، نور سبز قابل رویت از خود ساطع می کند. این پروتئین برای تولید نور سبز به هیچ کوفاکتور یا سوبسترایی نیاز ندارد. یکی از نسخه های اصلاح شده gfp، پروتئین mgfp5-er است که سیگنال پپتید موجود در ناحیه n-terminal موجب هدایت آن به شبکه اندوپلاسمی می شود. در این تحقیق توالی کد کننده mgfp5-er با استفاده از چهار سری آغازگر اختصاصی از روی ژن mgfp5 موجود در پلاسمید pcambia 1304 مونتاژ شد و برای حفظ آن، ژن مورد نظر در ناقل ptz57r/t کلون گردید. خصوصیت منحصر به فرد این ژن نسبت به دیگر گزارشگرها، سیگنال ترشحی اضافه شده به آن است. می توان با اتصال ژن مورد نظر به این گزارشگر و بیان آن تحت یک پروموتور مناسب، هم بیان و هم مسیر انتقال آن را در گیاه مورد کنترل قرار داد و همچنین می توان آن را مستقیما در فضای بین سلولی تولید کرد.