شناسایی سویه های مایکو باکتریوم توبرکلوزیس مقاوم به ریفامپین با استفاده از real-time pcr

مقدمه:عمده مقاومت به ریفامپین به دلیل تجمع جهش در یک ناحیه 81 جفت بازی از ژن rpob رخ می دهد.جهش در این ناحیه مسئول 98% از مقاومت به ریفامپین می باشد.هدف از این مطالعه راه اندازی روشی مبتنی برreal-time pcrو شناسایی سریع سویه های مقاوم با استفاده از آنالیز موتاسیون در این ناحیه است. روش کار:به منظور تکثیر قطعه 196 جفت بازی در برگیرنده ناحیه rrdr پرایمرهای مناسب طراحی شدند.جهت تشخیص جهش در کدونهای 526و531 یک جفت پروب نشان دار با فلورسانت مورد استفاده قرارگرفت.46 نمونه مثبت و منفی که حساسیت و مقاومت آنها با روش کشت و آنتی بیوگرام تائید شده بود به منظور ارزیابی روش مورد استفاده قرار گرفت.به منظور تعیین اختصاصیت روش از چند نمونه غیر مایکوباکتریوم توبرکلوزیس استفاده شد. نتایج:نتایج حاصل از روش راه اندازی شده در تمامی نمونه ها اعم از مقاوم وحساس با نتایج فنوتیپی همخوانی داشت.همچنین استفاده از سویه های غیر مایکوباکتریوم توبرکلوریس هیچگونه جواب مثبتی ایجاد نکرد. بحث و نتیجه گیری:روش راه اندازی شده به علت حساسیت و اختصاصیت بالا میتواند به عنوان ابزاری مناسب برای تشخیص سویه های مقاوم به ریفامپین مایکوباکتریوم توبرکلوزیس استفاده شود.