استفاده از کالیبراسیون مرتبه دوم جهت افزایش کارایی hplc-dad برای اندازه گیری همزمان کاربامازپین و فنوباربیتال در نمونه های سرم

در این رساله یک تکنیک جدید و جامع برای اندازه گیری همزمان دو داروی ضد صرع کاربامازپین و فنوباربیتال در بافت سرم با استفاده از کروماتوگرافی شویش سریع در زمانی کمتر از 5 دقیقه معرفی شده است. هم چنین با توجه به خاصیت ضد درد کاربامازپین، به عنوان کاربرد روش در نمونه های واقعی، غلظت این دارو در بافت سرم 27 بیمار معتاد به مورفین که داروی کاربامازپین به عنوان عامل ضد درد قبل از عمل جراحی به آنها داده شده بود در سه گروه مختلف، قبل ازعمل، 2 ساعت بعد از عمل و 12 ساعت بعد از عمل جراحی اندازه گیری شده است. در ابتدا با بهره گیری از استخراج مایع- مایع، نمونه ها پاکسازی شدند و سپس به دستگاه hplc-dad با شرایط ستون bonous-rp (mm6/4×150) با قطر ذرات µm 5، فاز متحرک بافر فسفات/ استونیتریل ( v/v45:55) با 5/7ph= و با سرعت ml/min1 به دستگاه تزریق شدند. پس از اطمینان از عدم اثر بافت زمینه از روش استاندارد خارجی برای اندازه گیری کمی استفاده شد. به دلیل حضور ترکیبات اندوژنوس در نمونه های سرم که به عنوان اجزاء کالیبره نشده تلقی می شوند، کالیبراسیون مرتبه دوم بر اساس mcr/als بر روی مجموعه ای از ماتریس های جذب اعمال شد. این ماتریس ها به صورت تابعی از زمان بازداری و طول موج جمع آوری شده اند. با به کار گیری موفق مزیت مرتبه دوم، جداسازی و تعیین مقدار ومطلوب در حضور مزاحمت بافت نمونه به دست آمد. متوسط بازده استخراج کاربامازپین و فنوباربیتال به ترتیب 7/89 و 1/86% و انحراف استاندارد نسبی کمتر از 9% بود. محاسبه منطق? اطمینان مشترک بیضوی(ejcr) صحت روش را اثبات کرد و هم چنین نشان داد که نتایج پیش بینی شده عاری از مقادیر قابل معنی دار خطای نسبی و ثابت است. روش معرفی شده امکان تعیین مقدار آنالیت ها در نمونه های مختلف سرم، حتی با وجود همپوشانی را فراهم کرد به نحوی که زمان آنالیز و هم چنین تعداد مراحل استخراج در کمترین سطح ممکن نگه داشته شد.