تثبیت آنزیم رودنیز کبد گاوی بر روی بستر mno2 نانوحفره جهت اندازه گیری سیانید

ورود مواد سیانوژنیک در چرخه غذایی یکی از مباحث مهم در امنیت غدایی می باشد این مسئله ضرورت استفاده از مواد مختلف به عنوان بیوسنسور را آشکار می سازد.آنزیم رودنیز یکی از آنزیم های مهم در سم زدایی یون سیانید محسوب می شود.برای تولید بیوسنسور سیانیدابتدا باید آنزیم رودنیز تثبیت گردد.به طور کلی تثبیت آنزیم ها به روش های مختلفی انجام می گیرد که یکی از این روش ها تثبیت به روش جذب سطحی است.در این تحقیق آنزیم رودنیز کبد گاوی بر روی بستر نانو حفره mno2 به روش جذب سطحی تثبیت و خصوصیات آن با آنزیم در حالت آزاد مقایسه شد.نتایج این مطالعه نشان می دهد که ph بهینه جهت فعالیت آنزیم رودنیز هم در حالت آزادو هم در حالت تثبیت شده برابر با8 می باشد، همچنین دمای بهینه فعالیت آنزیم رودنیز در حالت آزادوتثبیت شده دمای 40 درجه سانتیگراد بدست آمد. بررسی پارامتر های سینتیکی آنزیم رودنیز در حالت آزاد نشان داد که km و vmax آنزیم برای سوبسترای سیانید پتاسیم برابربا 25/3 و 11/6 و برای سوبسترای تیوسولفات 79/5 و 75/7 می باشد. بررسی پایداری آنزیم در دمای 85 درجه سانتیگراد نشان داد که پس از 10 دقیقه انکوباسیون میزان فعالیت آن 69 درصد فعالیت کنترل می باشد. بررسی میزان تکرار پذیری قابل استفاده بودن آنزیم تثبیت شده نشان داد که آنزیم تثبیت شده بر روی نانو حفره mno2 پس از 4 بار شستشو دارای کاهش فعالیتی در حدود 90 درصد کنترل می باشد.