بررسی میزان بیان تعدادی از ژن های دخیل در سرطان در چند رده سلول سرطانی مختلف به روش rt-pcr

سرطان ، بیماری است که مشخصه آن رشد و تقسیم سلولی کنترل نشده است. برای توسعه سرطان ، ژن هایی که تنظیم کننده رشد و تمایز سلول هستند باید جهش یافته وتغییر کنند. این جهش ها باعث تغییر میزان بیان ژن ها شده ، سپس از طریق تقسیم های بعدی سلول نگهداری و در نتیجه در تمام سلول های سرطانی آشکار می گردند. پروفایل بیان ژن یک تکنیک مورد استفاده در زیست شناسی مولکولی است که باعث اندازه گیری بیان هزاران ژن به طور همزمان می گردد. در زمینه سرطان، پروفایل بیان ژن برای طبقه بندی تومورها با دقت زیاد استفاده شده است. اطلاعات به دست آمده از پروفایل بیان ژن می تواند، برای مثال، تمایز بین سلول هایی که فعالانه تقسیم می شوند را نشان دهدو یا نشان دهد که چگونه سلول ها به یک درمان خاص واکنش نشان می دهند .سیستم آرایه real-time pcr ،تکنیکی که به طور گسترده ای به کار گرفته می شود ابزاری ایده آل برای تجزیه و تحلیل بیان پانل مورد نظر از ژن هاست .در این مطالعه با روش rt-pcr نیمه کمی ،نسبت بیان ژنهای دخیل در سرطان bcl2-p53-kit-src-her2-mtor-vegf-pi3k نسبت به ژن ?- actin (ژن کنترل) در 5 رده سلول سرطانی با منشا انسانی(سرطان ریه)-a549 (سرطان پروستات)-pc3 (سرطان سینه)t47-d-mcf-7 و(سرطان تخمدان)skov3 که امروزه شیوع زیادی داشته اند، و 1 رده سلول غیر سرطانی با منشا انسانی fs-15 مشخص گردیده است.بدین منظور ابتدا رده های سلولی مورد استفاده از انستیتو پاستور ایران تهیه گردید و پس از کشت ، محتوای mrna تام این سلول ها در زمان مناسب با استفاده از کیتrnaesy mini kit متعلق به شرکت qiagen استخراج گردید و سپس توسط واکنش rt با استفاده از کیت revert aid first strand cdna synthesis kit به cdna تبدیل گردید.سپس با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده برای هر ژن واکنش زنجیره ای پلیمراز به وسیله دستگاه realtime -pcr step one plus در بخش بیولوژی شرکت توفیق دارو setup گردید. بر طبق نتایج بدست آمده در رده سلول سرطانی skov3 میزان بیان ژن های her2 و vegf به ترتیب 05/51 و87/3 در رده سلول سرطانی mcf-7 وt47-d میزان بیان ژن p53 به ترتیب 92/2 و91/5 در رده سلول سرطانی pc3 میزان بیان ژن src ، 4 /4 در رده سلول سرطانی a549 میزان بیان ژن های her2 و p53 وsrc به ترتیب 94/2 و01/5 و 35/3 در رده سلول غیرسرطانی fs-15 میزان بیان ژن های bcl2 و p53 به ترتیب 06/3 و11/2 ، نسبت به ژنهای مورد مطالعه دیگر بیان بالاتری را نشان می دهند .بیان بالای این ژنها در این رده های سلولی می توانندبه عنوان مارکر ژنی مورد توجه قرار گیرد.ژن های pi3k و kit در رده های سلولی مورد مطالعه بیان بسیارکمی داشته است و یا بیانش به قدری کم بوده که توسط دستگاه قابل شناسایی نبوده است .اطلاعات بدست آمده از میزان بیان هر یک از ژن های مورد نظر به محققینی که روی ژن خاصی مطالعه می کنند در انتخاب سل لاین مناسب می- تواند کمک کند.