همسانه سازی ژن dszc باکتری رودوکوکوس اریتروپولیس r1 و ساخت وکتور بیانی آن

چکیده: یکی از مشکلات مهم در پالایشگاه ها، سولفورزدایی از نفت و مشتقات آن بدون آسیب به اسکلت کربنی و کاهش ارزش سوختی می باشد. بخش عمده ی سولفور موجود در نفت را ترکیبات آلی مانند تیوفن و مشتقات آن همچون دی بنزوتیوفن (dbt) تشکیل می دهند. ریزسازواره های مختلفی اعم از باکتری ها و قارچ ها قادر به سولفورزدایی از dbt تحت شرایط متعارف و بدون کمترین آسیب به اسکلت کربنی طی مسیر s4 می باشند. در ریزسازواره ها اپرون dszabc و ژن dszd مسئول بیان آنزیم های درگیر در این مسیر و ایجاد فنوتیپ سولفورزدایی هستند. در این تحقیق ژن dszc برای اولین بار از باکتری رودوکوکوس اریتروپولیس سویه ی r1 با تکنیک pcr جداسازی شده و به منظور تعیین توالی وارد ناقل همسانه سازی pjet1.2/blunt گردید. همچنین به منظور بررسی بیان، ژن dszc مربوط به رودوکوکوس اریتروپولیس سویه ی r1 به ناقل puc19 منتقل شده و به داخل باکتری اشرشیا کلی xl1blue ترانس فورم شد. dszc در این میزبان تحت پروموتور القایی lacz بیان شد. سویه نوترکیب حاصل در محیط حاوی dbt قادر به حذف کاملdbt از محیط کشت، بعد از دو روز بود. نتایج نشان داد که در صورت همسانه سازی ژن های درگیر در مسیر s4 تحت پروموتور-های قوی و فاقد خصوصیت مهارکنندگی سولفات، می توان سویه های نوترکیب توانمند در سولورزدایی و قابل استفاده در مقیاس صنعتی تولید کرد. کلمات کلیدی: سولفورزدایی، همسانه سازی، رودوکوکوس اریتروپولیس r1، ژن dszc