همسانه سازی و بیان ژن پروتئین نوترکیب ویروس پیچیدگی برگ شلغم (tctv) در باکتری escherichia coli

چکیده ویروس پیچیدگی برگ شلغم ( turnip curly top virus, tctv) یک جمینی ویروسی جدید با ویژگی های منحصر به فرد است که در سال 1389 از ایران (فارس) گزارش شده است. مطالعه ویژگی های بیولوژیکی این ویروس، مستلزم برقراری یک روش ردیابی ویروس در طبیعت است. بدلیل کارائی بهتر روش های سرولوژیکی در شناسایی ویروس های گیاهی، در تحقیق حاضر اقدام به فراهم سازی بستری جهت تولید آنتی بادی و به تبع آن، ردیابی این ویروس در طبیعت گردید. بدین منظور، بجای تهیه ویروس خالص، تولید پروتئین پوششی نوترکیب ویروس در سیستم پروکاریوتی مد نظر قرار گرفت. ژن مزبور جهت بیان، پس از همسانه سازی در ناقل pqe60، به باکتری e. coli جدایه m15 منتقل شد. پس از القای بیان، پروتئین تولید شده با استفاده از تکنیک sds-pageمورد بررسی قرار گرفت. بر اساس نتایج بدست آمده، پروتئین پوششی ویروس پس از رنگ آمیزی، در ژل پلی اکریل آمید 5/12% مشاهده گردید. وزن مولکولی پروتئین پوششی بر اساس نرم افزار آنلاین expasy7/33 کیلو دالتون محاسبه گردید که با وزن مولکولی نوار مشاهده شده در آزمون sds-page نیز مطابقت داشت. از این پروتئین می توان در آینده برای تولید آنتی بادی جهت آزمون های سرولوژی استفاده نمود. واژه های کلیدی: بیان پروتئین پوششی، ویروس پیچیدگی برگ شلغم، سیستم پروکاریوتی