تعیین ویژگی های آنزیم تخریب کننده ی زانتان جدا شده از سویه ی بومی

زانتان پلی ساکارید مهم تجاری است که توسط xanthomonas campestris تولید می شود و به دلیل ویسکوزیته ی بالا در صنایع دارویی ، غذایی و ازدیاد برداشت نفت کاربرد دارد. زانتان پلی مری خطی از گلوکز با پیوند ? (1?4) می باشد که زنجیره جانبی باردار منفی به آن متصل شده است. تجزیه ی زانتان نیز مانند تولید آن می تواند کاربردهای عمده ای داشته باشد. دو دسته آنزیم تخریب کننده ی زانتان وجود دارد. گروه اول شامل هیدرولازهایی هستند که زنجیره ی اصلی را می شکنند. گروه دوم شامل زانتان لیاز می باشد که باعث آزادشدن مانوز انتهایی زانتان می شود. در این پژوهش ph، درصد نمک، درصد زانتان و دمای بهینه ی رشد باکتری paenibacillus sp.sm0 و تولید آنزیم زانتان لیاز مورد بررسی قرار گرفت. تخلیص این آنزیم با روش های رسوب دهی با آمونیوم سولفات، ستون کروماتوگرافی تعویض آنیونی، ژل فیلتراسیون، با استفاده از هیدروکسی آپاتیت و ژل الکتروفورز انجام شد. نتایج نشان داد که زانتان لیاز در غلظت60% اشباع آمونیوم سولفات رسوب می کند و بیشترین میزان تخلیص و فعالیت ویژه این آنزیم نیز مربوط به این روش می باشد. در ژل فیلتراسیون و رسوب دهی با آمونیوم سولفات دو آنزیم زانتان لیاز و زانتاناز از یکدیگر جدا شدند و وزن مولکولی زانتان لیاز حدود 85 کیلودالتون تعیین گردید. ph بهینه فعالیت آنزیم زانتان لیاز برابر 8 در بافر تریس اسید کلریدریک است. دمای بهینه ی فعالیت اش oc30 می باشد. همچنین سوبسترا ویژگی و اثر یون های فلزی، edta، dtt و سایر قندها بر فعالیت زانتان لیاز تعیین شد. dtt اثری بر فعالیت اش نداشت.hg2+ و edta باعث کاهش 60 % فعالیت آنزیم شدند. fe3+ فعالیت آنزیم را به طور کامل منع کرد. شناسایی مولکولی باکتری نشان داد که این جدایه 98% به paenibacillus phyllosphaerae قرابت دارد و به عنوان paenibacillus sp.sm0 نامگذاری شد.