ساخت کتابخانه ای از موتان های تصادفی در ژن نانوبادی علیه زیرواحد urec از اوره آز هلیکوباکتر پیلوری با استفاده از روش pcr مستعد خطا

دست ورزی آنتی بادی های مهم از نظر کلینیکی، می تواند در بهبود تشخیص و درمان موثر باشد. فرایند بلوغ افینیتی توانایی قابل توجهی در بهبود کارایی آنتی بادی ها دارد. یکی از راه های پیشنهادی استفاده از روش جهش زای pcr مستعد خطا برای افزایش افینیتی آنتی بادی ها می باشد. در تحقیق پیش رو این روش، روی آنتی بادی زنجیره سنگین شتری (vhh، نانوبادی) ایجاد شده علیه زیرواحد urec آنزیم اوره آز h.pylori اعمال شد. اوره آز مهم ترین عامل بیماری زایی h.pylori است و جایگاه فعال آنزیم در زیرواحد بزرگ آن (urec) قرار دارد. این vhh به عنوان مولکول پایه برای ساخت یک کتابخانه ی نمایش فاژی بزرگ و متنوع از vhhهای تصادفی مورد استفاده قرار گرفت. کتابخانه ی فاژی حاوی نانوبادی های جهش یافته، در معرض چندین مرحله غربالگری علیه آنتی ژن urec در فاژ الایزا قرار گرفت و یک vhh جهش یافته با افینیتی بالاتر از نوع اولیه جدا شد. این vhh به میزان 5/1 برابر نسبت به vhh اولیه فعالیت اتصالی بیشتری به آنتی ژن هدف نشان داد. به علاوه، این vhh جهش یافته، عملکرد بهتری در مهار فعالیت اوره آزی به خصوص در غلظت های کم آنتی بادی داشته است، در حالی که اختصاصیت و پایداری دمایی خود را حفظ می کند.